隨著免疫分析日益廣泛應用于以臨床為主以及非臨床領域的診斷工業（diagnostic
industry），免疫分析向兩個方向發展：一類為全自動化的免疫分析；另一類為以硝酸纖維膜為載體的快速免疫分析。前者需要價格昂貴的全自動儀器及與儀器嚴格配套的各種試劑盒，目前只能在醫療及檢測中心應用，雖也能較快速給出結果，但仍需一定時間，不適合遠離醫療及檢測中心的地區，更不能用于“患者床旁檢驗”
（real time clinical
decision）和普查的需要，在酶免疫分析的基礎上，主要以硝酸纖維素膜為載體的快速診斷方法迅速和廣泛地發展起來。這類方法目前在文獻及市場上的命名還很不統一。它實際上屬于快速斑點免疫結合分析（dot
immunobinding assay, DIBA），始于80年代。現介紹如下：
一、兩種模式
1、班點免疫滲濾分析（dot immunofiltrtion assay, DIFA） 免疫反應是通過垂直穿透固定有配體的硝酸纖維素膜而進行的（flow through type）。
2、斑點免疫層析分析（dot immunochro-matography assay ，DICA） 分析原理與DIFA相同，只是反應液體的流動不是直向的穿透流動，而是層析作用的橫向流動（lateral flow type），在1990年開始應用。
兩種類型快速免疫分析比較見表。
表 免疫滲濾分析和免疫層析分析的比較
| 免疫滲濾分析（穿透濾過型） | 免疫層析分析（橫向流動型） | |
| 硝酸纖維素膜的種類及形式組成方式 | 為圓片膜，孔徑0.2-0.4μm較簡單，由載有配體( 抗體或抗原)的硝酸纖維素膜片及底層的吸水墊料組成 | 為窄長型膜，依靈敏度及流速的要求，選用孔徑不同的合適的膜。自下端至上端(由左至右)由:（1）樣品墊 (sample pad) （2）載有固相標記配體 抗體(或抗原)的玻璃纖維素膜條或聚酯膜條(conjugate release membrane) （3）合適孔徑的硝酸纖維素膜條(噴涂有顯示陽性結果的捕捉分析物的配體線，和陰性對照組線)(ni-trocellulose memtrane)4. 吸水墊(absorbent pad)等四部分銜接固定在不干擾免疫反應和流速的簿塑料背板上(back sheet) |
| 標記配體的形式 | 為液相形式 | 根據需要及可能可設計同時 大多數為固相形式 |
| 多功能性 | 測定一種以上分析物加樣、洗滌、加標記 | 同左 |
| 操作步驟 | 配體及洗滌等步驟 | 大多數只有加樣一個步驟 |
注: 以上標記配體均為膠體金或硒標記、分散型染料標記等。如為酶標記則二者都必須增加“加顯色底物”的步驟
二、標記物的種類
標記物包括、膠體金屬（膠體金，膠體硒）、分散型染料（disperse dyes）和染料標記的微球（latex particles）等，標記物各有優缺點，可根據以下的標準選擇，如：靈敏度，所需要的顏色，分析的模式和操作步驟，制備、保證重復性、急定性及規模及的難易程度和重復性，以及標記物所需配體量等。其中酶雖然有高靈敏度，重復性好及標記物易規模化等優點，但它需要洗滌，加底物等步驟，需要反應的時間也長些，對技術也有一些要求，故未能作為快速診斷的主要標記物（1985年最初的免疫滲濾分析是以酶作為標記物）。目前應用最廣泛的標記物為膠體金，包括：膠體金免疫滲濾分析（gold immumofiltraition assay GIFA）或滴金免疫分析和膠體金免疫層析分析（gold immunochromatography assay ， GICA）。由于GICA更簡便快速，已成為目前最主要的快速免疫分析方法之一。
三、原理
膠體金免疫滲濾分析（GIFA）原理與操作步驟基本與ELISA相同：加樣品于固定有配體（抗體或抗原，此處以抗體為例，下同）的硝酸纖維素膜上，通過滲濾在膜中形成抗體-抗原復合物，洗滌滲濾后，再加液體的膠體金標記抗體。當結果為陽性時，在膜上固定有抗體-抗原-膠體金標記抗體復合物而呈現紅色斑點。膠體金免疫層析分析CICA原理與GIFA相同，只是操作步驟有所不同，如反應液體流動方向由垂直滲濾改為橫向層析流動（見表）：樣品加樣品墊（1）上，樣品向吸水墊（4）方向流動，途徑載有固相膠體金標記抗體膜（2）后，將金標記物完全復溶，抗原與金標記抗體形成金標記抗體-抗原復合物，繼續向前流動至硝酸纖維素膜條（3）上，固定有捕捉抗原的抗體線處。當結果為陽性時，金標記抗體-抗原復合物上，就會形成金標記抗體-抗原-固相抗體復合物，呈現紅色陽性條帶；如樣品中無抗原，則不被捕獲，就不顯色，則結果為陰性。多余的游離金標記抗體繼續前移至固定有抗金標記體二抗處，被固定呈現紅色的陰性對照。GICA與GIFA不同之處在于后者只是單一的免疫層析條，不需要其它試劑，一步操作。二者與ELISA不同處是反應時間大大縮短，僅需要數分鐘就完成了ELISA需數小時才能顯示的結果。因為在GIFA和GICA中，高濃度的抗體集中固定在纖維素的微孔中，待測抗原在滲濾或層析時，流經微孔與固定的高濃度抗體緊密接觸，很快完成免疫結合反應。這就是以膜為基礎的膠體金快速免疫結合分析中的免疫濃縮作用（immunoconcentraiton）。在ELISA中，待測抗原要在液相中經過擴散作用，逐漸與吸附在固相表面的抗體結合。同時，標記抗體也需要同樣的擴散結合過程形成抗體-抗原-標記抗體復合物，故需時間較長。