實驗原理 1、(色素提取原理:色素溶于有機溶劑而不溶于水，可用95%的乙醇、丙酮等有機溶劑來溶解色 素，從而提取綠葉中的色素。色素提取也可用水浴加熱法，即把葉片剪碎后放在95%的乙醇 中，進行隔水加熱來提取。一般地說，葉片加熱到變成黃白色，葉片中的色素基本上被提取出 來了。2、(色素分離原理:各種色素在層析液中溶解度不同，溶解度高的隨層析液在濾紙上擴散速度比 較快，反之則比較慢，從而使各種色素相互分離開來。
二、實驗中幾種化學藥品的作用
95%的乙醇 ：溶解色素，提取色素；
層析液 ：分離綠葉中的色素 ；
二氧化硅 ：增加杵棒與研缽間的摩擦力，破壞細胞結構，使研磨充分 ；
碳酸鈣 ：防止研磨過程中色素被破壞。
三、實驗流程
（1）提取綠葉中的色素——研磨法
稱取、剪碎5g葉片，放入研缽中。加入少許二氧化硅、碳酸鈣、5mL丙酮。快速、充分研磨。
根據葉綠體中的色素在有機溶劑（乙醇、丙酮等）中溶解的特性，用丙酮可將色素從葉片中提取出來（若用95％的酒精作溶劑，則應向色素提取液中加入無水碳酸鈉，除去色素提取液中的水分。若用丙酮作溶劑，則用量不宜過多，以2～5mL為宜，過多會影響色素濃度，過少不易過濾），過濾后收集濾液（將研磨液迅速倒入基部已放—塊單層尼龍布的漏斗中過濾），將濾液收集到小試管中，及時用棉塞將試管塞緊備用。注：也可以不過濾，加入適量的丙酮把葉子研磨成糊糊狀，再用載玻片（或木工用的竹筆）的一端蘸取研磨液直接點樣即可。
（2）制備濾紙條
將干燥過的定性濾紙剪成6 cm×l cm的條，一端剪去兩角，距該端lcm處用鉛筆畫一條極細的橫線。用毛細吸管吸取少量濾液，沿鉛筆線均勻畫一條細而直的濾液線，待干燥后再重復畫2～3次（次數越多色素越多）。
（3）色素分離------紙層析法
將干燥后的濾紙條畫線一端朝下放入有少許 （2～3mL）層析液的燒杯中，蓋上培養皿。
（4）觀察層析后，取出濾紙條，烘干后觀察色素分離情況。
（5）整理、洗手。
四、實驗結果及分析
1、從色素帶的寬度可推知色素含量的多少依次為:葉綠素a,葉綠素b,葉黃素,胡蘿卜素。
2、從色素帶的位置可推知色素在層析液中的溶解度大小依次為:胡蘿卜素,葉黃素,葉綠素a, 葉綠素b。
五、實驗中的注意事項
1、選材: 選取鮮嫩深綠的葉片，以保證含有較多的色素。
2、提取色素:研磨要迅速、充分，以保證提取較多的色素。
3、點樣:用力要均勻，快慢要適中。濾液細線要細、直，且干燥后重復畫3~4次，使濾液細線既 有較多的色素，又使各色素擴散的起點相同。
4、色素分離:濾紙上的濾液細線要高于層析液液面，不要觸及層析液，以防色素溶解到層析液中，濾紙條上得不到色素帶。
5、實驗安全:本實驗需接觸層析液等有害物質，實驗結束后一定要用肥皂將手洗凈。
六、實驗成功的關鍵
1、選取的葉片要新鮮、顏色要深綠，以保證含有較多的色素。
2、研磨要迅速、充分。葉綠素不穩定，易被活細胞內的葉綠素酶水解，因此要加碳酸鈣，以防止色素被破壞。乙醇容易揮發，所以研磨要迅速。充分研磨使葉綠體完全破裂，從而提取較多 的色素。
3、濾液細線不僅要求細、直，而且要求含有較多的色素，所以要求待濾液干后再畫2~3次。
4、濾液細線不能觸及層析液，否則色素溶解到層析液中，濾紙條上得不到色素帶。