分離獲得ASC后,可以通過連續傳代使其生長和擴增。原代培養后,傳代2?3次,ASCs呈現單層,大而扁的細胞形態,其直徑在25?30μm。待細胞達到匯合時,它們形態上呈紡錘體形,類似于成纖維細胞。來源:《人干細胞培養》
| 實驗材料 | |
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| 試劑、試劑盒 | |
| 儀器、耗材 | |
| 實驗步驟 | (a)細胞達到80%匯合時即可傳代。 (b)棄去培養基,加人PBSA洗滌貼壁細胞。 (c)加入足量胰蛋白酶,使之覆蓋細胞,將培養瓶中,置于37℃,5% CO2溫箱中。 (d)細胞與胰蛋白酶共孵育3 min后,用細胞刮將細胞刮下。 (e)加人ASC培養基使胰蛋白酶失活。 (f)按照1:2比例,將細胞接種至2個T-25培養瓶中。 |