1、原理:
(1)在牛奶中加入氨水(濃氨水)破壞牛奶中蛋白質的膠體性質,使乳中酪蛋白鈣鹽生成可溶性的氨鹽。
(2)加入95%乙醇使乳中脂類與非脂類分離。
(3)加入乙醚抽取脂類。
(4)加入石油醚除去乙醚中包容的水分。
(5)到出醚層,揮發除去乙醚、石油醚;剩下的脂肪即為牛奶中的脂肪。
2、檢測步驟:
(1)用電子天平精確稱取10g均勻牛奶樣(奶粉1克用9毫升蒸餾水溶解分次洗)于毛氏抽脂瓶中。
(2)加入2ml濃氨水,充分混勻。
(3)加入10ml95%乙醇,加入2滴剛果紅,充分混勻。
(4)加入25ml乙醚,振搖1分鐘,100次/1分鐘,振搖過程中要放氣1~2次,用混合液洗瓶塞。
(5)加入25ml石油醚,振搖半分鐘,振搖過程中放氣1~2次,用混合液洗瓶塞后靜置半小時。
(6)小心地將靜置后的醚層倒入三角瓶(洗凈、烘干1.5小時后,天平室內無塵,自然冷卻1小時,稱重m1)中,并用混合試劑洗瓶頸。
(7)再向毛氏抽脂瓶中加入5ml乙醇,充分搖勻。
(8)加入15ml乙醚,振搖100次/1分鐘,用混合試劑洗瓶塞。加入15ml石油醚振搖半分鐘,用混合試劑洗瓶塞,靜置半小時。
(9)將靜置后的醚層再倒入三角瓶中,并用混合試劑洗瓶頸。
(10)將兩次抽提的醚液(在三角瓶內),于30~60℃,水浴鍋中,在通風櫥里揮發除去乙醚、石油醚。
(11)將剩有脂肪的三角瓶放98~100℃烘箱中烘1.5小時,至恒重,取出在天平室內無塵自然冷卻1小時后稱重m2.
3、計算:
m2-m1
脂肪含量%=───────×100
M
式中:m2——脂肪和空三角瓶重(g)
m1——空三角瓶重(g)
M——稱取牛奶質量(g)
FT120測定(略)
蘇丹三鑒定法
(1)把材料用切片機切成1mm的小薄片,并移至潔凈的載玻片上
(2)用滴管滴加2~3滴蘇丹三染液,染色2~3min后用吸水紙吸去染液并滴加1~2滴50%的酒精洗去浮色再吸去酒精
(3)滴加1~2滴蒸餾水后蓋上蓋玻片在顯微鏡下觀察
(4)橘黃色的小顆粒即為脂肪
應用于脂肪測定的新技術:超微濾袋技術
由于濾袋技術(Filter Bag Technology,FBT)用于批量分析飼料中的纖維含量的推廣,使ANKOM Technology聞名于世。早在1993年ANKOM纖維分析儀就已經被世界各地廣泛應用于準確測定酸性洗滌纖維(Acid Detergent Fiber, ADF),中性洗滌纖維(Neutral Detergent Fiber, NDF)和粗纖維(Crude Fiber, CF)。基于在纖維分析方面已獲得的經驗,ANKOM Technology新近又開發了一項快速批抽提脂肪技術(Accelerated Batch Extraction, ABE)。ANKOM脂肪分析儀是采用ANKOM技術開發的一項使用普通溶劑快速抽提食品和飼料脂肪的新技術而研制成的。