脂肪酸合酶的測定實驗

酰基 CoA：丙二酰 CoA C-轉酰基酶（脫羧、異丁基還原、烯酰還原與硫酯水解）。

乙酰-CoA＋n 丙二酰-CoA＋2n NADPH＋2n H^＋ → CH₃-（CH₂-CH₂）n-CO-CoA＋n CoA＋n CO₂＋2n NADP＋＋n H₂O

式中，n＝6～8。

脂肪酸合酶

磷酸鉀EDTA二硫赤蘚糖醇乙酰-CoA丙二酰 CoANADPHBSA

分光光度計

實驗所需「試劑」具體見「其他」

0.96 ml 實驗混合物

0.02 ml 酶樣品

25℃ 時，觀察 3～4 min 于 340 nm 處吸收值降低

開始反應需加入 0.02 ml 0.007 mol/L 丙二酰-CoA 0.14 mmol/L

25℃ 時，于 340 nm 處吸收值降低，ε₃₄₀＝6.3×10³ l/（mol·cm）。

試劑：

0.1 mol/L 磷酸鉀，pH 6.5

0.1 mol/L EDTA（Mr＝292.2；292 mg 溶于 10 ml 水中）

0.1 mol/L 二硫赤蘚糖醇（DTE，Mr＝154.2 或二硫蘇糖醇，DTT，Mr＝154.2；154 mg 溶于 10 ml 水中）

0.01 mol/L 乙酰-CoA（Li₃ 鹽，Mr＝827.4；8.3 mg/ml）

0.007 mol/L 丙二酰 CoA（Mr＝877.3，Li₄ 鹽；6.1 mg/ml）

0.01 mol/L NADPH（Mr＝833.4，Na₄ 鹽，83 mg 溶于 10 ml 水中）

2.4％ BSA（240 mg 溶于 10 ml 水中）