腦脊液穿刺部位有腰椎穿刺、小腦延髓池穿刺等，其中腰椎穿刺簡單易行且危險性小。
穿刺術通常由臨床醫師進行。
標本抽出后，按先后順序分別收集于3支無菌試管中，第1管做細菌學檢查，第2管做生化檢查，第3管做細胞計數。
采集的腦脊液標本應盡量避免凝固和混入血液。標本采集后應立即送檢。
