近十幾年來，隨著對ADA的深入研究，檢測方法也不斷發展。目 前已發展了四代。
第一代ADA測試
ADA將腺苷 （Adenosine） 脫氨產生次黃苷（Inosine） 和氨 （NH3）。一個ADA活性單位在測試特定條件下每分鐘脫氨1μmole腺苷成為次黃苷。通過動態測量腺苷265nm處吸光度下降的速度，可以測算ADA的活性大小。Kaplan法 （1955） 由此建立。由于高底物濃度造成吸光度過高，該法僅適用于腺苷濃度低于40μM。如此低的底物濃度達不到底物飽和要求，造成ADA活性檢測失真。因此，該法不適用于臨床應用。
第二代ADA測試
原理為腺苷脫氨酶催化腺嘌呤核苷水解，產生次黃嘌呤核苷和氨。然后用Berthelot顯色反應（1859）測定反應過程中產生氨的量，從而計算血清ADA活性單位。所需試劑易配制，儀器簡單，但靈敏度低，易受外源性NH3影響，空白過高，不能直接測定紅細胞ADA活性。
同樣原因，ADA偶聯谷氨酸脫氫酶（Glutamate Dehydrogenase， GLDH）反應：
通過測量340nm處NADPH吸光度下降的速度來測算ADA活性。該法也因血清含氨干擾，以及測試系統中過高NADPH造成非特異性氧化而無成算。
第三代ADA測試
Kalckar氏應用ADA偶聯嘌呤核苷磷酸化酶（Purine nucleoside phosphorylase，PNP） 和黃嘌呤氧化酶（Xanthine Oxidase， XOD） 反應連續監測法。通過測量293nm處尿酸鹽吸光度上升的速度來測算ADA活性。
但是，293nm時血清吸光度太高，造成臨床應用不便。
第四代ADA測試
通過ADA偶聯PNP，XOD，過氧化氫酶（Catalase）和醛脫氫酶（Aldehyde dehydrogenase），借助過氧化氫（H2O2）反應測量334nm處NADPH吸光度上升的速率來測算ADA活性。該法克服了以往ADA測試的困難，然而，鑒于試劑成本高，阻礙實際臨床使用。
最新對第四代測試方法的改進為偶聯PNP，XOD和過氧化物酶（Peroxidase， POD）反應。ADA酶解腺苷（Adenosine）脫氨產生次黃苷（Inosine）；再通過PNP的作用，生成次黃嘌呤（Hypoxanthine）；后者在XOD氧化下生成尿酸（Uric Acid）和過氧化氫（H2O2）；最后在POD的作用下H2O2再與N-Ethyl-N-（2-hydroxy-3-sulfopropyl）-3-methylaniline （EHSPT）、4-氨基安替比林（4-aminoantipyrine， 4-AA）反應（Trinder氏反應），生成紫紅色的有色醌（Quinone dye）。通過動態測量有色醌550nm處吸光度上升的速度來測算ADA的活性。從反應原理可知NH4+對該法無影響。其原理反應方程式如下：
反應具有測定精密度高，抗干擾能力強，適合自動化快速測定的特點，為臨床常規開展ADA檢測應用創造了有利條件。
邁克腺苷脫氨酶（ADA）檢測試劑盒性能指標
檢測方法：XOD-PAP法（第四代改良法），不與其它核苷反應，無NH4+影響，靈敏度高。
劑 型：液體雙試劑，直接使用，避免復溶引起瓶間差。
線性范圍：0～200U/L，γ2≥0.99
準 確 度：不準確度正常水平≤15%，異常水平≤10%。
穩 定 性：密閉避光貯存2～8℃可穩定12個月，開瓶上機2～8℃避光穩定30天。
抗干擾能力：標本中膽紅素≤342umol/L，血紅蛋白≤200mg/dl，甘油三酯≤8.47mmol/L，抗壞血酸≤4mg/dl 及NH4+對本試劑測定無影響。
適 用 性：適用于各種半/全自動生化分析儀。
參考范圍：4～22U/L（37℃），建議各實驗室建立自己的參考值范圍。