第十四節 熒光檢測器
液相色譜儀熒光檢測器（FLD）是基于具有熒光的物質在一定條件下發射熒光的強度與物質的濃度成正比進行檢測。
一、結構：
FLD由光源、選擇激發波長用的單色器、樣品流通池、選擇發射波長的單色器和光電檢測器等組成。
二、工作機理：
當某些溶液受紫外光照射后，能吸收紫外光而處于不穩定的激發狀態，緊接著輻射出比紫外光波長更長的光線即熒光。在被測溶質濃度較低時，溶質受激發而發生的熒光強度與被測溶質的濃度成正比。
由FLD光源發出的光經激發光單色器后，得到所需要的激發光波長，激發光通過樣品流通池，一部分光線被熒光物質吸收，熒光物質激發后，向四面八方發射熒光。為了消除入射光與散射光的影響，一般取與激發光成直角的方向測量熒光（直角光路）。熒光至發射光單色器分光后，單一波長的發射光由光電檢測器接收。
三、特點：
1、優點：
（1）靈敏度極高，是最靈敏的檢測器之一。檢測下限為10ˉ12～10ˉ14g/mL，比UVD高100倍，可用于痕量分析。
（2）選擇性好，產生熒光的必要條件：
1）物質分子中具有能吸收激發光能量的吸收帶，即物質分子必須具有一定的吸收結構。
2）物質分子吸收激發光能量后熒光效率高。
（3）對溫度和流量不敏感。當所選用的流動相溶劑不發射熒光時，可用于梯度洗脫。
（4）所需樣品量很小，特別適合藥物和生物化學樣品等檢測。
（5）受外界條件的影響小。
2、缺點：
（1）定量分析時線性范圍較窄，不宜作為一般的檢測器使用。
（2）測定中不能使用可熄滅、抑制和吸收熒光的溶劑作流動相。
（3）對不能直接產生熒光的物質，要使用色譜柱后衍生技術，操作比較復雜。
四、應用：
1、適用于具有熒光的有機化合物的檢測。共軛和芳香族化合物最容易有熒光現象。氨基酸、胺類、維生素、甾族化合物和某些代謝藥物可用FLD檢測。
2、有的有機物雖然本身不產生熒光，但可與發熒光物質反應衍生化后檢測。
第十五節 化學發光檢測器
化學發光檢測器是近年來發展起來的一種快速、靈敏的新型液相。
一、工作原理：
某些物質在常溫下進行化學反應，生成處于激發態反應中間體或反應產物，當它們從激發態返回基態時發射出光子。由于物質激發態的能量是來自化學反應，故稱為化學發光。當被測組分從液相色譜柱中洗脫出來后，立即與適當的化學發光試劑混合，引起化學反應，導致發光物質產生輻射，其光強度與該物質的濃度成正比。
化學發光檢測器不需要光源，也不需要復雜的光學系統，只要有恒流泵將化學發光試劑以一定的流速泵入混合器中，使之與色譜柱流出物迅速、均勻地混合，產生化學發光，通過光電倍增管將光信號變成電信號，進行檢測。
二、特點：
1、檢測下限可達10ˉ12g。
2、線性范圍寬。
3、檢測快速。
4、結構簡單，價廉。