3-1 柱的結構
1、堵棒(或導管)2、接頭 3、接頭 4、密封圈 5、螺帽 6、柱密封圈 7、柱管 8、柱填料 9 10、過濾片
3-2 柱的分類:
根據所有的擔體材料分為三種:
a.硅膠型:機械強度高,易制成小顆粒,理論塔板數高。
b.聚全物型:在廣泛的PH值范圍內穩定
c.羥基磷灰石型:對蛋白質等生物高分子樣品有特殊的選擇性。
根據分離方式分類:
a.硅膠型
1) 正相:SIL--磷脂、NH--糖、維生素E,CN--甾類激素。
2) 反相:ODS(C18)、(C8 CN TMS Pheny1)低分子量化全物。
3) 離子交換:
WAX(弱堿陰離子交換)--核苷酸、蛋白質
WCX(弱酸陽離子交換)--蛋白質
SAX(強堿陰離子交換)--核苷酸
SCX(強酸陽離子交換)--兒茶酚膠
4)凝膠過濾:
Diol--蛋白質 GF--蛋白質
b.聚合物型:
1)反相:ODP--50--肽,蛋白質,低分化合物。
2)離子交換:ISC--氨基酸,胍類化合物,ISA--糖,IC--無機離子,PA--蛋白質,ES--蛋白質。
3)配位交換:SCR(磺化聚苯乙烯)--糖。
4)離子排阻:SCR-101H 102H--有機酸
5)凝膠過濾:ION--多糖 GS--水溶性分子
6)凝膠滲透色譜(GPC):GPD--合成分子、橡膠。
7)羥基磷灰石型:HPC--蛋白質、核苷酸
按尺寸分類:
1.制備:30mm 50mm 內徑,半制備:20mm內徑。
2.分析:標準型柱:4_8mm內徑。
快速色譜柱:3mm內徑、5cm長、4.6mm內徑。
小孔徑柱:2.5mm內徑,微孔徑柱1mm內徑。
3-3柱的技術指標
*耐壓:不小于40Mpa。
*滲透性:反相--流動相甲醇1ml/min,壓力3Mpa。
正相--正乙烷1ml/min,壓力3Mpa.
*柱效:理論塔板極數>3x103。
*對稱柱:葸峰不對稱因子AS在0.8~2.0范圍內。
*外觀:光潔、標牌、尺寸、填充劑、流動相方向、日期等。
ODS柱
ODS(C18)色譜柱是將十八烷基鍵合在擔體的表面,然后填充的柱,在HPLC中應用廣。在HPLC中反相色譜的引用占70%,其中極大部分 使用的是ODS(C18)。本公司所附的柱也是ODS(C18)柱,內徑4.6mm,長度150mm。
一般反相色譜系統,流動相為極性溶劑,如水、甲醇、乙腈,非極性固定相,如十八烷基。反相系統簡單,重復性好,柱子能長期穩 定工作,能完成分離、分析任務的60-80%,所以分析工作者使用得zui多的是反相柱。
柱的使用和維護
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