色譜柱的正確運用和保護養護:
色譜柱的正確運用和保護十分重要,稍有不小心就會下降柱效、縮短運用壽數乃至損壞。在色譜操作過程中,需求注意下列疑問,以保護色譜柱。
1、新的色譜柱前運用要活化
2、防止壓力和溫度的急劇改動及任何機械轟動。溫度的俄然改動或許使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充情況;柱壓的俄然升高或下降也會激動柱內填料,因此在調理流速時大概緩慢進行,在閥進樣時閥的轉變不能過緩(如前所述)。
3、應逐步改動溶劑的組成,特別是反相色譜中,不該直接從有機溶劑改動為全部是水,反之亦然。
4、一般說來色譜柱不能反沖,只要生產者指明該柱能夠反沖時,才能夠反沖除掉留在柱頭的雜質。不然反沖會敏捷下降柱效。
新色譜柱的活化:1、裝置以乙腈(反相)或乙腈正己烷(1:99)正相沖刷整個系統。
2、查看流路體系有無氣泡,氣泡會形成色譜柱填料空隙而影響色譜柱的別離效能。
3 按色譜柱上標明方向,接上色譜柱,開始流速為0.1-0.2ml/min逐步大,1.0ml/min,所需試劑為10倍柱體積,暫停體系,更換流動相,開始流速為0.1-0.2,逐步增大,直到體系平衡。
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