方法提要：試樣中的左旋肉堿經稀鹽酸提取，皂化后使結合態的左旋肉堿游離出來。陽離子交換固相萃取柱凈化，供液相色譜-質譜/質譜儀測定。
樣品處理
提取：乳粉、液體飲料類（左旋肉堿含量小于等于1000 mg/kg樣品）：稱取1 g（精確到0.01 g）于50 mL容量瓶中，加入50 μL內標液[1 mg/mL左旋肉堿氘同位素的乙腈-水溶液（9:1）]，渦旋振蕩1 min，超聲5 min溶解樣品，加入5 mL 1mol/L氫氧化鉀溶液渦旋混合，60℃水浴皂化30 min，冷卻至室溫，加入5 mL 1 mol/L鹽酸溶液，渦旋混勻1 min，以0.1 mol/L鹽酸溶液定容至50 mL.取1 mL提取液于15 mL試管中，加入9 mL乙腈，渦旋混勻1 min后取部分于5 mL離心管中，16000 r/min離心5 min，所得上清液待凈化。左旋肉堿含量大于1000 mg/kg的樣品先稀釋后再提取。固體飲料類用水溶解并稀釋至合適含量后提取。
凈化：取1 mL待凈化溶液于活化好的陽離子固相萃取柱中，以1滴/秒的速度過柱，用3 mL 10 mmol/L的鹽酸水溶液淋洗，棄去淋洗液，真空抽干1 min，用2 mL 4%氨水甲醇溶液洗脫，收集洗脫液于15 mL離心管中，40℃下氮氣吹干，所得殘渣中準確加入0.1%甲酸水溶液1.0 mL，超聲1 min溶解殘渣，過0.22 μm濾膜，供液相色譜-質譜/質譜儀測定。