蘋果酸脫氫酶測定實驗

L-蘋果酸：NAD 氧化還原酶，MDH。

L-蘋果酸 ＋ NAD＋? 草酰乙酸 ＋ NADH ＋ H＋

實驗首選逆反應。

MDH 稀釋溶液

磷酸鉀NADH草酰乙酸

分光光度計

實驗所需「試劑」具體見「其他」

0.98 ml 實驗混合物

0.02 ml MDH 稀釋溶液

25℃ 時，于 340 nm 處吸收值降低。NADPH 的吸收系數 ε₃₄₀＝6.3×10³ l/（mol·cm）。

試劑

0.1 mol/l 磷酸鉀，pH 7.5

0.01 mol/l NADH（71 mg 溶于 10 ml H₂O）

0.1 mol/l 草酰乙酸（Mr＝132.1，132 mg 溶于 10 ml 0.1 mol/l 磷酸鉀，pH 7.5 中）

MDH 原料溶液（例如 10 mg/ml，用 0.1 mol/l 磷酸鉀 pH7.5 稀釋至 1 IU/ml）