本實驗介紹 3 種莢膜染色法:濕墨水法、干墨水法和Anthony 氏法。其中濕墨水法較簡便、并適用于各種有莢膜的細菌。
莢膜是包圍在細菌細胞外的一層粘液狀或膠質狀物質,其成分為多糖、糖蛋白或多肽。由于莢膜與染料的親和力弱不易著色;而且可溶于水,易在用水沖洗時被除去。所以通常用襯托染色法染色,使菌體和背景著色,而莢膜不著色合在菌體周圍形成一透明圈。由于莢膜含水量高。制片時通常不用熱固定,以免變形影響觀察。
褐球固氮菌/膠質芽孢桿菌(約 2d 無氮培養基瓊脂斜面培養物)
繪圖墨水1% 甲基紫水溶液1% 結晶紫水溶液6% 葡萄糖水溶液20% 硫酸銅水溶液甲醇
載玻片蓋玻片濾紙顯微鏡
1. 制備菌和墨水混合液
加一滴墨水于潔凈的載玻片上,然后挑取少量菌體與其混合均勻。
2. 加蓋玻片
將一潔凈蓋玻片蓋在混合液上,然后在蓋玻片上放一張濾紙,輕輕桉壓以吸去多余的混合液。
3. 鏡檢
用低倍鏡和高倍鏡觀察,若用相差顯微鏡觀察效果更好。
背景灰色,菌體較暗,在藏體周圍呈現明亮的透明圈即為莢膜。
加蓋玻片時勿冒氣泡,以免影響觀察。