熒光光度計的光源和紫外可見

　　在生物實驗中，常常看到可見分光光度計、紫外可見分光光度計、熒光分光光度計。但可能很多人不太清楚它們之間的區別，現將其簡要介紹如下。

　　一、可見分光光度計與紫外可見分光光度計的區別

　　1、儀器分析的波長范圍不一樣，紫外可見分光光度計的波長范圍是：200nm-1000nm，其中200nm-330nm標定為紫外光譜，330nm-800nm標定為可見光譜，800nm-1000nm標定為近紅外光譜。而可見分光光度計的波長范圍只在可見光譜區內330nm-800nm。

　　2、儀器使用的光源不一樣，在目前國內外的分光光度計中，大部分紫外光源用的是氘燈，可見光源用的是鎢燈，紫外燈源的價格相對可見燈源的價格要高很多，當然也有一些用氙燈替代氘燈和鎢燈，其價格更高。

　　3、儀器分析物質也不一樣，紫外光譜大都分析有機物，可見光譜大都分析無機物，當然也不是絕對的，只是大部分有機物的吸收敏感點在紫外光譜區，無機物的吸收敏感點在可見光譜區。

　　4、儀器結構設計不一樣，紫外可見分光光度計要求儀器的體積相對可見分光光度計要大一些，這其中除了考慮多了一個燈的擺放位置，還要考慮到燈的散熱。

　　5、還有儀器其它的一些不一樣的，例如：電路設計原理、色散元件、光電轉換元器件等。

　　6、可見分光光度計一般使用玻璃比色皿即可，而紫外可見分光光度計的紫外區段需使用石英比色皿（最好是黑色石英比色皿，可以遮擋雜光）。

　　7、可見分光光度計和紫外可見分光光度計亦可以使用全波段酶標儀代替。

　　二、紫外可見分光光度計與熒光分光光度計的區別

　　1、原理不一樣。熒光分光光度計由高壓汞燈或氙燈發出的紫外光和藍紫光經濾光片照射到樣品池中，激發樣品中的熒光物質發出熒光，熒光經過濾過和反射后，被光電倍增管所接受，然后以圖或數字的形式顯示出來。紫外分光光度計是根據朗伯-比耳定律(Lambert－Beer)光吸收的基本定律，即物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量。通俗的說，熒光分光光度計是測樣品中物質被激發出了光能量，紫外分光光度計是測樣品中物質吸收了光能量，原理完全不同。

　　2、光源不一樣。紫外-可見分光光度計在紫外區使用氫燈或氘燈,在可見光區使用氘燈或溴鎢燈.它們發出的都是連續光譜,通過三棱鏡（中檔）、光柵（高檔）、濾光片（低級）等分光,這樣兩種燈組合基本涵蓋了紫外-可見光的波長范圍. 熒光分光光度計由氙弧燈發出的光通過切光器使其變成斷續之光以及激發光單色器變成單色光后,此光即為熒光物質的激發光,被測的熒光物質在激發光照射下所發出的熒光,經過單色器變成單色熒光后照射于測樣品用的光電倍增管上.

　　3、儀器結構不一樣。熒光分光光度計的光源和檢測器是成直角分布的,而紫外是成一條直線的.

　　4、儀器分析的物質不一樣。紫外-可見分光光度計可用于大部分有色物質的定量監測,通常需要使用各種各樣的顯色劑；熒光分光光度計可用于測試發光材料的發射光譜＼激發光譜＼時間掃描,不需要顯色劑,靈敏度比紫外-可見分光光度計高2－3個數量級.

　　5、熒光分光光度計的比色皿是四壁均為光學面,而紫外僅兩面為光學面.