步驟
1、樣品萃取
將飄塵樣品(玻璃纖維濾膜的塵面朝里折疊后)小心放進索氏提取器的滲濾管中(放時不要讓濾膜堵塞回流管)。加入50ml環己烷,置于溫度為99℃±1℃水浴中(水面以達到接收瓶高的2/3為宜)連續問流8h。
根據提取液顏色深淺,取全部或將提取液定容到50ml后,取部分置于KD濃縮器中,在70～75℃的水浴中減壓濃縮至近干。濃縮管用苯洗三次,每次3～4滴,用氮氣吹至0.05ml,以備紙層析用。
2、紙層析分離
在準備好的15cm×30cm乙酰化濾紙30cm長的下端3cm處,用鉛筆輕輕地畫一橫線,兩端各留出1.5cm,以2.4cm的間隔將標準BaP與樣品濃縮液用玻璃毛細管交叉點樣。點樣斑點直徑不要超過3～4mm。點樣過程中用冷風吹干。每個濃縮管洗兩次,每次用1滴苯,全部點在紙上。將點完樣的層析濾紙掛在層析缸內架子上,加入展開劑(甲醇:乙醚蒸餾水=4:4:1(體積比)),直到紙下端浸入1cm為止。用透明膠紙密封,于暗室中展開2～16h(可根據工作安排,靈活選擇展開時間)取出層析濾紙,在紫外分析儀下用鉛筆圈出標準BaP斑點以及樣品與其高度(R值)相同的紫藍色斑點范圍。
剪下用鉛筆圈出的斑點,剪成小條,分別放入5ml離心管中,在105～110℃烘箱中烘10min(或在干燥器中晾干,也可在于凈空氣中晾干)在干燥器內冷卻后,加入丙酮至標線。用手振蕩1min后,以300r/min的速度離心2min。上清液留待測量用。
3、樣品測定
將標準BaP斑點和樣品斑點的丙酮洗脫液倒入1cm的石英池中,在激發、發射狹縫分別為10nm和2nm,激發波長367nm處,測其發射波長402、405、408nm處的熒光強度F。