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  • 發布時間:2022-10-19 12:02 原文鏈接: 熒光定量PCR數據分析舉例

      首先看基線與閾值設置的是否合理;在基線和閾值設置合理的基礎上,得到的CT值才是準確可靠的;在CT值是準確的基礎上再進行相對定量或絕對定量實驗。

        數據分析

        1 絕對定量實驗數據分析注意要點:

        1.1 絕對定量實驗對檢測體系的擴增效率不做硬性要求;

        1.2 檢測的樣本濃度必須落在標曲線性范圍之內;否則該樣本檢測濃度不在此標曲有效范圍內,需要根據實際情況擴大標曲的范圍或對樣本進行稀釋或濃縮使之落在標曲線性之內;

        1.3 標曲與待測樣本必須在同一趟實驗上進行才有效,不可用不同趟實驗的標曲進行絕對定量計算;
        數據分析

        數據分析

        2 相對定量實驗數據分析注意要點:

        2.1 相對標準曲線法:注意要點同絕對定量;

        2.2 2的-δδCt法: 本方法要求靶標基因和內參基因的擴增效率盡可能相等且接近100%; 參比樣本和實驗樣本的靶標基因和內參基因在同一趟實驗中進行檢測;

        靶標基因

        數據分析


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