熒光染色顯示Y染色質法

發布時間：2019-04-11 18:16 原文鏈接：熒光染色顯示Y染色質法

實驗方法原理	在間期細胞核中，女性X染色質和男性Y染色質均可用特殊染色法顯示出來。女性的兩個X染色體中的一個，在間期時的染色質呈異固縮（Heteropyconosis），呈深染的小體稱Barr氏體。Barr氏體位于間期細胞核內面，呈三角形或半月形小體，易為碳酸復紅或硫堇等染料著色。正常女性Barr氏體陽性，男性為陰性。男性Y染色質位于間期細胞核近中央部，易為鹽酸阿的平著色，熒光顯微鏡下觀察發較強熒光，呈點狀小體，發光部分系Y染色體異固縮的長臂。初代培養細胞和二倍體細胞株均可觀察到性染色質，傳代細胞系表現不規律。
試劑、試劑盒	Sorensen PBS Atebrine
實驗步驟	一、染色步驟 1. 細胞蓋片培養細胞用37 ℃的BSS漂洗后，立即投入染色液內染色5～10 分鐘（亦可先固定再染色）；如用涂片標本則應待涂片干后，迅速投入96 %酒精固定10～15 分鐘后再染色； 2. 分化用96 %酒精分化1 分鐘，分化時要不斷搖動，把片子上多余的染料漂洗掉； 3. 脫水通過純酒精1 分鐘； 4. 封片二甲苯透明2～3 分鐘，樹膠封固。二、結果在熒光顯微鏡下觀察，Y染色質呈特別明亮黃綠色熒光圓點，直徑0.25～0.3 微米，可位于核內任何位置，但以近中央時居多。展開

實驗方法原理

在間期細胞核中，女性X染色質和男性Y染色質均可用特殊染色法顯示出來。

女性的兩個X染色體中的一個，在間期時的染色質呈異固縮（Heteropyconosis），呈深染的小體稱Barr氏體。Barr氏體位于間期細胞核內面，呈三角形或半月形小體，易為碳酸復紅或硫堇等染料著色。正常女性Barr氏體陽性，男性為陰性。

男性Y染色質位于間期細胞核近中央部，易為鹽酸阿的平著色，熒光顯微鏡下觀察發較強熒光，呈點狀小體，發光部分系Y染色體異固縮的長臂。初代培養細胞和二倍體細胞株均可觀察到性染色質，傳代細胞系表現不規律。

試劑、試劑盒

Sorensen PBS Atebrine

實驗步驟

一、染色步驟

1. 細胞

蓋片培養細胞用37 ℃的BSS漂洗后，立即投入染色液內染色5～10 分鐘（亦可先固定再染色）；如用涂片標本則應待涂片干后，迅速投入96 %酒精固定10～15 分鐘后再染色；

2. 分化

用96 %酒精分化1 分鐘，分化時要不斷搖動，把片子上多余的染料漂洗掉；

3. 脫水

通過純酒精1 分鐘；

4. 封片

二甲苯透明2～3 分鐘，樹膠封固。

二、結果

在熒光顯微鏡下觀察，Y染色質呈特別明亮黃綠色熒光圓點，直徑0.25～0.3 微米，可位于核內任何位置，但以近中央時居多。

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