熒光檢測方法真的過時了嗎？

Tesla Model S 和 Model X所代表的電動汽車是目前公認最先進和最具有未來感的汽車。其加速性超越了燃油動力汽車，續航里程與燃油車不相上下，其環境友好性遠超燃油車，并且具有自動駕駛能力，是汽車中的大眾情人。

然而如果時光倒轉20年來看，電動汽車確實是過時的產品：早在19世紀90年代，其銷量甚至是燃油車的十倍。Studebaker、Columbia Electric與Detroit Electric等多個公司生產電動汽車，其時速達到了每小時20英里，具有100英里的續航。然而，最終在大批量流水線以及石油工業蓬勃發展的趨勢下被燃油車取代。在之后的整整一個世紀中寂寂無聞，被認為是過時的產品。

隨著近十年電池、電動機以及高性能計算領域的長足進步，電動車又隨著Tesla殺回了主流市場，甚至燃油車領域的大佬們也紛紛推出了自己的電動車。這個現象讓人感嘆技術潮流的不斷更迭。

對于生物檢測來說，熒光方法與電動車在汽車發展趨勢中的現象類似。早在1941年，Coons等就使用熒光素標記抗體來顯示抗原的位置，甚至比1971年問世的ELISA更早。早期的熒光標記方法作為放射標記的替代品，使得檢測的安全性大大提高。但是，由于當時的熒光分子量子效率、穩定性不足，對使用環境敏感度高，并且受限于光學檢測系統中光源穩定性、檢測器靈敏度以及光路設計的不完善，導至熒光方法的靈敏度受到限制。從而使得檢測中的燃油車—化學發光成為了當前檢測技術中的主導。

就像是Tesla帶動電動車實現了逆襲一樣，熒光方法也在眾多的尖端科研與檢測領域開始逐步復興：從熒光分子本身來說，在結構不斷優化與溶劑的配合下，其穩定性得到了長足進步。

Invitrogen的Alexa熒光染料可以提升10倍的激發穩定性；無機熒光分子又向兩個方面發展：稀土金屬在增強劑的作用下利用時間分辨，獲得了原熒光方法百倍以上的信噪比；

從儀器的角度來看，Singulex使用了共聚焦技術來縮小檢測區域并且在100微秒的探測時間內實現單分子熒光檢測，獲得了fg/mL等級的靈敏度；

PacBio使用zero-modewaveguide的近場熒光檢測技術，實現了單分子實時高讀長測序（單次讀長超過15000bp）；

Luminex使用多種熒光物質混合不同比例制成多種微球，通過多重激光來分辨每個微球中各個熒光物質比例，可以實現在一個樣本中500個不同的檢測；

Illumina使用高速熒光掃描技術，使得測序通量提高到了1.8Tb，個人基因組跨入了$1000的界限。這些令人激動的熒光技術引領了新的技術潮流，使得檢測可以更加靈敏、快速、穩定與高效。

在熒光方法的復興中，星童醫療技術也通過使用具有ZL技術的高分子聚合物熒光，將原有熒光信號強度提升了1000倍，同時通過使用高純度石英探針獲得了超低熒光背景，兩者共同作用大幅提高了檢測靈敏度。

熒光方法是否真的過時了，還是像Tesla一樣正在加速向前呢？答案不言而喻！