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  • 發布時間:2021-07-27 13:42 原文鏈接: 熒光素酶報告基因與綠色熒光蛋白(GFP)有什么區別

    只能先就標題的問題談談我的認識。后面的追問我了解得也不全面。
    1。兩者的結果檢測方法不同。gfp綠色熒光蛋白,很直觀,能夠直接檢到熒光,在普通的細胞培養條件下都能夠觀察到,對細胞的生命活動和其他并行的實驗安排影響很小。熒光素酶報告基因使用起來比gfp多一個步驟,因為熒光素酶是個酶,不發熒光,發熒光的是它的底物,熒光素。熒光素在細胞里(要說螢火蟲細胞我就不知道了哦)是沒有的。所以檢測熒光素酶的通常步驟是裂解細胞,釋放熒光素酶,與熒光素及其他所需化學物質混合,才得到熒光。現在雖然也有活細胞內檢測熒光素酶的手段,但要將熒光素送入活細胞,本身就已要對細胞進行相當的干擾。所以一般來說熒光素酶實驗的同一批細胞不適合再做其他并行實驗。
    2。兩者的結果含義不同。gfp如果說是定量檢測表達蛋白的話,這個定量只能夠指,表達的細胞是多少個,不表達的細胞是多少個。gfp對于單個細胞來說,就有陽性和陰性兩種結果罷了。gfp不能夠定量地告訴你,這個/群細胞里的表達量是多高還是多低。熒光素酶就能夠定量地得到表達量/表達水平的數值,但這個數值是相對于一群細胞來說,而不是對于單個細胞。所以熒光素酶常常用來研究啟動子的功能與調控,因為啟動子對基因表達的調控可以是漸變的,而不是簡單的開和關兩種狀態。

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