熒光western Blot:選擇可見熒光檢測還是紅外檢測?
熒光檢測的主要優勢之一是可以進行多重檢測(2種甚至更多種蛋白)。當前的實驗技術允許使用近紅外檢測兩種蛋白也可以使用三色RGB可見熒光檢測三種蛋白。
近紅外檢測的優勢
同時檢測三種蛋白要比兩種好,為什么我們還要選擇紅外成像呢?
紅外熒光檢測印跡膜上的靶標蛋白是行之有效的western blot方法,特別是在探測低豐度蛋白的微弱信號時,近紅外檢測是最好的選擇。NC(硝酸纖維素)膜存在自發熒光,紅外區背景噪音相比于可見熒光區低很多,信噪比更高,更容易檢測到靶標蛋白。

激光-紅外western
Azure c系列成像系統采用激光光源激發,發射光更接近染料的最大發射波長680nm和800nm,二抗產生的信號更高。

可見熒光檢測的優勢
當需要同時檢測三個蛋白時,可見熒光顯然是最佳的選擇。可見熒光具備很好的靈活性,有多種可見熒光染料可供選擇。如果您正在使用可見熒光染料(發射光譜可被區分)進行其它實驗,很容易將這些染料應用于Western blot實驗中。
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