藥物對動物體內溶血素含量的影響實驗

實驗方法原理

《名醫別錄》對人參的臨床藥用選擇還有“人薓乃重百濟者，星系而堅白，味薄於上黨，次用高麗，高麗即遼東，形大而虛軟，止應擇取之爾，實用并不及上黨者，不乃百濟遠矣，百濟今屬高麗，高麗所獻兼有兩種”的描述，

實驗材料 小鼠

試劑、試劑盒 綿羊紅細胞補體都氏試劑人參氫化可的松注射液

儀器、耗材 微量加樣器恒溫振蕩器紫外可見分光光度計

實驗步驟

1.  實驗分組及處理昆明種小鼠80只，體重18~22 g，隨機分為8組，即空白對照組、正常遼寧人參灌胃組、正常吉林人參灌胃組、正常朝鮮人參灌胃組、免疫低下模型對照組、免疫低下遼寧人參治療組、免疫低下吉林人參治療組和免疫低下朝鮮人參治療組，每組10只，雌雄各半。

2.  飼養動物3天后，免疫低下模型組和三地人參免疫低下治療組小鼠皮下注射氫化可的松注射液，70 mg/kg（體重），1次/d，連續1周。

3.  待模型完成后，空白對照組和免疫低下模型組正常飼養，不限飲食；正常三地人參灌胃組和三地人參免疫低下灌胃組分別以三地人參水煎劑灌胃，5 g/kg（體重）/d（即100%煎劑0.2 mL/只），1次/d，連續2周。

4.  待治療完成后小鼠眼球取血分離血清。

5.  血清溶血素含量測定用生理鹽水將綿羊紅細胞（SRBC）水洗3次（1000～2000 r/min，5 min），棄去上清液，3∶5（V/V）用生理鹽水把SRBC稀釋為2×109個/mL。

6.  取材前4天小鼠腹腔注射配制好的SRBC 0.2 mL

（1）取材當日小鼠摘眼球取血、分離血清，并將血清稀釋500倍。

（2）取1 mL 稀釋后的血清加入反應管，再加0.5 mL SRBC，置冰浴中，每管加入1 mL 補體。

（3）將反應管移至37℃水浴中，10分鐘后再移至冰浴中。

（4）冰浴后2000 r/min 離心10 min，取上清1 mL，加入3 mL 都氏試劑混勻，10 min 后用分光光度計（540 nm）測定吸光度。

7.  測定實驗用的SRBC半數溶血時的吸光度值，并取同實驗用的SRBC 0.25 mL，加4 mL 都氏試劑，搖勻，10 min后 用分光光度計測定吸光度，作用為半數溶血對照。

8.  換算公式如下：樣品HC50=（樣品吸光度值×稀釋倍數）/SRBC半數溶血時的吸光度。

9.  統計分析各組數據均采用（x±s）表示，采用SPSS17.0統計軟件進行方差分析。

其他

一、討論

近年來對人參的研究更多的是注重對人參的有效成分的研究，如對Rg1、Rg2、Rg3等成分的研究；或是注重人參的某種已知對某種疾病的作用的研究，對于生長環境相似的這三種人參對機體免疫系統影響的比較研究極少。本實驗基于這一理由，對三地人參進行了對比研究。

由實驗結果可知三地人參對正常小鼠的溶血素水平沒有影響，實驗數據顯示正常三地人參灌胃組的溶血素含量雖與空白對照組相比無統計學差異，但3組在含量上均略低于空白對照組，且三地人參效果相似。

這一結果證實，人參可使機體的溶血素含量下降，但對正常機體影響不大，能維持在正常水上平。實驗結果還顯示三地人參對免疫低下小鼠溶血素含量沒有提高作用，其水平不僅低于正常水平，還低于免疫低下模型組的水平。這一結果與人參水溶性物質具有抑制IgG產生的作用這一結論相類似，既人參煎劑使機體的特異性體液免疫水平降低，這一結果與人參產地無關，其機制將在后續研究中探討。

人參對正常小鼠或免疫功能低下小鼠溶血素含量的影響，三地人參的作用是相同的。

綜上實驗得出結論：三地人參對正常小鼠溶血素水平沒有影響；氫化可的松所致的免疫低下可使小鼠溶血素含量降低，經遼寧、吉林和朝鮮三地人參煎劑灌胃后不能使其溶血素含量提高，且使之進一步下降；人參對免疫低下小鼠溶血素含量的影響與人參產地無關。

實驗結果從另一個方面提示，大量資料證實人參對機體免疫系統具有調節作用，特別是對機體細胞免疫功能具有提高作用；本課題組經研究也將在另文中證實人參煎劑可提高機體的T細胞功能。但人參水溶劑對機體的體液免疫的影響還有待進一步研究，因此，人參使用過程中應注意選擇適應癥，以發揮人參的功效。