1、微生物發酵法
在15%~35%的葡萄糖溶液中加入硫酸鎂、磷酸二氫鉀和磷酸氫二銨等營養物質,接種黑曲霉菌種NRRL3,在30℃和pH6.5的條件下通氣培養40h。過濾發酵液,再經后處理得內酯結晶。
2、葡萄糖氧化酶法
在35~37℃和Ph6的條件下,在乙醇水溶液(如50%)中,葡萄糖氧化酶將葡萄糖氧化為內酯和葡萄糖酸的平衡溶液,反應過程中也加入過氧化氫酶,以分解所產生的過氧化氫。所得到的葡萄糖酸的溶液,經上述的后處理方法可得內酯結晶,此法收率可達98%。