微生物發酵法
在15%～35%的葡萄糖溶液中加入硫酸鎂、磷酸二氫鉀和磷酸氫二銨等營養物質，接種黑曲霉菌種NRRL3，在30℃和pH6.5的條件下通氣培養40h。過濾發酵液，再經后處理得內酯結晶。
葡萄糖氧化酶法
在35～37℃和Ph6的條件下，在乙醇水溶液(如50%)中，葡萄糖氧化酶將葡萄糖氧化為內酯和葡萄糖酸的平衡溶液，反應過程中也加入過氧化氫酶，以分解所產生的過氧化氫。所得到的葡萄糖酸的溶液，經上述的后處理方法可得內酯結晶，此法收率可達98%。
催化氧化法
在8%的葡萄糖水溶液300g中加入上述Pd/C催化劑，在50℃下通入空氣，同時滴加NaOH溶液，保持pH=9.0～9.5，當pH值不再下降時反應結束，濾去催化劑，用陽離子交換樹脂處理得310g葡萄糖酸液。在70℃下減壓濃縮至濃度80%～85%，冷卻至40℃以下，加入晶種，待結晶后過濾、干燥得22.6g內酯，濾液再濃縮、結晶，又可得5.3g產品，總收率為93.3%。
以葡萄糖酸鈣為原料
該法先將葡萄糖酸鈣通過無機酸分解或離子交換樹脂脫鈣得葡萄糖酸溶液。如將100份濃硫酸加入500份水中，再加入葡萄糖酸鈣，在60-85℃下保溫1.5h；靜置12h后過濾，濾液加草酸，并在50℃下保溫1h；靜置后過濾得葡萄糖酸液，經后處理得內酯。后處理的方法有以下三種：
非溶劑結晶法：將葡萄糖酸液減壓濃縮至漿狀，加入低級酮類非溶劑，緩緩攪拌冷卻，使結晶析出，再經分離、洗滌、干燥得成品。此法操作簡便，收率也較高。
分步結晶法：在52～54℃下將葡萄糖酸液濃縮至78%～85%，冷卻至47~48℃，加入葡萄糖酸內酯晶種，并繼續濃縮，待晶種長大后分離得第一批內酯結晶。母液以同樣的方式繼續蒸發濃縮。結晶經洗滌、干燥得成品，總得率為75%～78%。此法優點是不用有機溶劑，但濃縮液黏度高，結晶分離操作困難。
共沸脫水結晶法：向葡萄糖酸液中加入C3～C4的烷醇，在50℃和16kPa下共沸脫水。然后向濃縮液中投晶種，降溫結晶，再經分離、洗滌、干燥得成品。此法優點是體系黏度低，分離操作容易，單程收率可達91%以上。