關于蒸發光散射檢測器的噪聲問題,一直都是實驗員詢問較多的。每一次都是詳細給客戶解答,并指導排查。下面將給大家系統解讀實驗室使用ELSD時常遇到的一些問題及排查方法。
關于蒸發光散射檢測器 概述蒸發光散射檢測器 蒸發光散射檢測器(ELSD)是一種通用型檢測器,可檢測揮發性低于流動相的任何樣品,而無需發色基團。 ELSD 靈敏度比示差折光檢測器高,對溫度變化不敏感,基線穩定,可與梯度洗脫液相色譜聯用。 ELSD 已被廣泛應用于碳水化合物、類脂、脂肪酸,氨基酸,藥物以及聚合物的檢測,尤其是中藥及中成藥的無紫外吸收的有效成分測定。
蒸發光散射檢測器檢測原理
蒸發光散射檢測器常見問題 噪聲變大 流動相(水/甲醇/乙腈/酸等),氣源,色譜柱,儀器管路,需要一一排查。 依次進行以下測試: 一、本底噪聲測試 a) 停流動相,單獨通載氣 b) 設置氣壓為3.5bar c) 觀察噪聲是否正常 · 如果噪聲高或出現鬼峰,漂移管中可能含有雜質。這種情況下,升高溫度至 90℃且將合適的溶劑(比如水--不接色譜柱)以1mL/min的流速泵入,氣壓3.5 bar(51 psi)。該溶劑由檢測器之前分析的樣品性質決定。如果檢測器之前分析的樣品性質未知,乙醇是最好的選擇。不要使用可能會腐蝕儀器的溶劑。保持流速和溫度至少3個小時。 · 如果噪聲不高,則繼續下一步排查。 二、溶劑噪聲測試 a) 撤掉色譜柱,通流動相,通載氣 b) 觀察噪聲是否升高 · 如果噪聲升高,就需要排查流動相的原因,例如:水/乙腈/三氟乙酸,先通純水,然后是水+乙腈,最后是水+乙腈+三氟乙酸,三種情況哪種基線變高就是哪種流動相的雜質含量過高,需要更換。 · 如果噪聲沒有升高,則說明是色譜柱問題,需要更換。 注意: 1. 溶劑中不可以添加非揮發性溶劑調節劑。可使用揮發性溶劑調節劑(如CHOOH, CH3COOH, CF3COOH, NH4 Formate, NH4 Acetate,(C2H5)3N)…), 但當增益較大時有可能會增大噪聲。 2. 如果使用氨基柱,并將氨基柱用于反相,在水的作用下,氨基會流失,噪聲就會比較大,可以通過提高有機相比例或更換其他種類的色譜柱來解決。 需逐一排查可能原因: 1. 溫度設置過低,流動相霧化不充分,造成底噪高 2. 溫度設置過高,待測組分揮發 3. 漂移管臟,造成底噪高 (解決方案同上面噪聲高時漂移管的清洗) 4. 廢液管沒入廢液瓶中,廢氣管內有液體 (廢液管必須在液面以上) 5. 排氣不暢,或外界抽氣壓力過大 (如下圖,正確擺放廢液) 溫度報錯 環境溫度過低或者主控板故障,請聯系工程師。 注意事項 1. 氣源:使用壓力3.5 bar,可以是氣瓶/空氣壓縮機,氣瓶的氣體可以是空氣/氮氣等惰性氣體,壓縮機類型:無油無聲空氣壓縮機有活性炭硅膠過濾,壓力0.6MPa以上,流量大于6L/min。氣瓶消耗量大約是每天8小時實驗,一周左右一瓶,適合ELSD實驗量小的用戶。空壓機適合長時間連續實驗的用戶,省去頻繁更換氣瓶的問題,節約成本。 2. 溫度:SEDEXE ELSD屬于低溫性蒸發光散射檢測器,可以用低于溶劑沸點的溫度揮發溶劑。例如:純水的沸點為100度,調節揮發溫度為40度就可以達到水完全揮發的效果,如果是甲醇,溫度35度就可達到。所以日常實驗中的梯度流動相,多種溶劑混合后的沸點是低于100度的,我們把溫度設置在40度就可以了。不是說溫度設置在60度80度就不可以,而是40度是它最佳的一個揮發溫度,揮發溫度越低樣品形成的顆粒越大,ELSD的響應值就越高。 3. 需要加改性劑調PH值時,需要用沸點低的三氟乙酸/甲酸/冰醋酸/三乙胺/醋酸胺,代替沸點高的磷酸/硫酸/鹽酸。 4. 開機:打開ELSD電源,打開載氣,設置溫度,GAIN值等參數。打開液相泵就可以做實驗了。如果柱子比較臟,需要先斷開ELSD,待色譜柱沖洗干凈后,再連接色譜柱和ELSD。(注:基線平衡時間和柱子/流動相有關,泵直接連ELSD且流動相雜質含量小于1ppm時基線平衡時間小于5分鐘) 5. 關機:實驗結束后將流動相換為100%甲醇沖洗ELSD 20分鐘,停泵后載氣繼續通20分鐘以上,關載氣關電源。切記,切記!
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