蔬菜和水果中氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定方法

1    試劑與材料

除非另有說明，在分析中僅使用確認為分析純的試劑和GB/T 6682規定的一級水。

1.1   乙腈。

1.2   丙酮，重蒸。

1.3   甲醇，色譜純。

1.4   氯化鈉，140℃ 烘烤4 h。

1.5   柱后衍生試劑，試劑包（P/N：YS-CB-001）

1.5.1    0.05mol/L NaOH 溶液：R315，以1 L水溶解。

1.5.2    OPA稀釋溶液：R312，以1 L水溶解。

1.5.3    領苯二甲醛（O-Phthaladehyde，OPA）：R301 。

1.5.4    疏基乙醇（Thiofluor）：R302 。

1.6    固相萃取柱，FJ-NH2-500.6：氨基柱，容積6 mL，填充物 500mg 。

1.7    濾膜，0.2μm，0.45μm，溶劑膜。

1.8    農藥標準品見表1

表1    10種氨基甲酸酯類農藥及其代謝物標準品

1.9    農藥標準溶液配制

1.9.1  單個農藥標準溶液，直接使用農藥標樣。（濃度為1000mg/L）

貯存在 -18℃以下冰箱中，使用時根據各農藥在對應檢測器上的響應值，吸取適量的標準儲備液，用甲醇稀釋配制成所需的標準工作液。

1.9.2  農藥混合標準溶液

根據各農藥在儀器上的響應值，逐一準確吸取一定體積的單個農藥儲備液，分別注入同一容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度配成農藥混合標準儲備溶液，使用前用甲醇稀釋成所需質量濃度的標準工作液。

2    儀器設備

2.1     液相色譜儀，梯度系統，配有熒光檢測器（FLD）。

2.2     食品加工器。

2.3     勻漿機。

2.4     氮吹儀。

2.5     柱后衍生系統：CoM6000PCR 雙柱后衍生系統

3    測定步驟

3.1     試樣制備

同NY/T 761-2008《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯農藥多殘留的測定》中第一部分的方法一。

3.2     提取

同NY/T 761-2008《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯農藥多殘留的測定》中第一部分的方法一。

3.3     凈化

從100 mL 具塞量筒中準確吸取10.00 mL 乙腈相溶液，放入150 mL 燒杯中，將燒杯放在80℃ 水溶鍋上加熱，杯內緩緩通入氮氣或空氣流，將乙腈蒸發近干；加入2.0 mL 甲醇+二氯甲烷（1+99）溶解殘渣，蓋上鋁箔，待凈化。

將氨基柱用4.0 mL 甲醇+二氯甲烷（1+99）預洗條件化，當溶劑液面到達柱吸附層表面時，立即加入上述待凈化溶液，用 15 mL 離心管收集洗脫液，用 2mL 甲醇+二氯甲烷（1+99）洗燒杯后過柱，并重復一次。將離心管置于氮吹儀上，水浴溫度50℃ ，氮吹蒸發至近干，用甲醇準確定容至 2.5 mL 。在混合器上混勻后，用0.2 μm 濾膜過濾，待測。

3.4    色譜參考條件

3.4.1  色譜柱

預柱：  C18預柱，600220；

分析柱：C42545，Comatex，C18-CB，5 μ ，250×4.6。

3.4.2  柱溫，42℃ 。

3.4.3  熒光檢測器，λex330 nm，λem465 nm。

3.4.4  溶劑梯度與流速

溶劑梯度與流速見表二                                        

表2    溶劑梯度與流速

3.4.5     柱后衍生

3.4.5.1  衍生劑1：（見試劑包使用說明），流速：0.5mL/min。

3.4.5.2  衍生劑2：（見試劑包使用說明），流速：0.5mL/min。

3.4.5.3  反應器溫度

水解溫度：100℃；衍生溫度：40℃。

3.5     色譜分析

分別吸取20.0 μL 標準混合溶液和凈化后的樣品溶液注入色譜儀中，以保留時間定性，以樣品溶液峰面積與標準溶液峰面積比較定量。