薄層色譜的應用范圍

薄層色譜的應用
薄層色譜技術的優點：薄層圖譜以彩色圖像呈現，直觀、易于辨認；廣泛的適用性，至今為多國藥典用于植物藥的鑒別；多樣品在同板同時平行比較；色譜可供多層次分析，制成的攝影可長期保留；可利用不同參數進行多次分析計算，不必重復分離。
TLC在中藥質量控制中的主要應用：鑒別、半定量評估、化合物定量分析。在沒有任何化學對照品的情況下，對比TLC板上相同位置斑點顏色，也能夠很容易地識別不同藥材。半定量評估包括過程控制、穩定性測試、限量檢查三個方面。在cGMP環境下，記錄原料在生產過程的每一步中如何轉換/保存、如何與成品比較、每一批產品的組分如何保持穩定等很有必要。利用HPTLC指紋圖譜，通過比較斑點數目、順序和相對強度（或者光密度掃描產生的峰）可以完成這些工作。且可以用鑒定過的原料或有獨立規范的成品作為參比物。穩定性測試是HPTLC比較新的一個應用，用以確定提取物和成品的保質期。測試是要確認產品在規定時間內能否保持穩定。另一方面，方法要能檢測到所有的降解產物。倘若方法經過嚴格驗證，可用半定量檢測進行穩定性測試，對被測的標示物無需測定其絕對量。采用定量配制的對照品對照或對照品稀釋對照。供試品溶液色譜中待檢查的斑點應與對應的對照品溶液或系列對照品溶液的相應斑點比較，顏色（或熒光）不得更深。或照薄層色譜掃描法操作，峰面積值不得大于對照品的峰面積值。必要時應規定檢查的斑點數和限量值。化合物定量分析化合物定量分析對TLC來說是最高要求。由于受到該技術分離能力的限制，像植物材料這樣的復雜樣品對其所有組分往往不能實現基線分離，因而大多數分析采用HPLC。
薄層色譜方法標準操作規程：薄層色譜是一開放體系，環境因素對色譜層析行為影響很大。而薄層色譜實驗過程各單元獨立，實驗人員參與的步驟操作多，因此不同人的操作技巧會明顯地影響色譜質量。同一份樣品，往往在不同人或不同實驗室得出完全不同的結果，這就要求必須建立薄層色譜SOP。而薄層色譜方法標準操作規程包括以下方面：代表性樣品的收集；薄層色譜條件的確立；樣品提取與前處理、點樣、飽和、展開劑、不同品牌薄層板、溫度、濕度、耐用性的考察；薄層板標注、文件名稱標注、圖譜輸出等。其中展開劑的選擇和優化屬關鍵環節。