薄層色譜法的操作步驟及注意事項

薄層色譜法的操作步驟及注意事項如下：
1、薄層板點樣后，應待溶劑揮發完，再放人展開室中展開。
2、展開應密閉，展距一般為8~15cm。薄層板放入展開室時，展開劑不能沒過樣點。一般情況下，展開劑浸入薄層下端的高度不宜超過0.5cm。
3、展開劑每次展開后，都需要換，不能重復使用。
4、展開后的薄層板用適當的方法，使溶劑揮發完全，然后進行檢視。
5、Rf值一般控制在0.3~0.8，當Rf值很大或很小時，應適當改變流動相的比例。
注意事項：鋪板用的勻漿不宜過稠或過稀：過稠，板容易出現拖動或停頓造成的層紋；過稀，水蒸發后，板表面較粗糙勻漿配比般是硅膠G：水=1：2～3，硅膠G：羧甲基纖維素鈉水溶液=1：2。研磨勻漿的時間，根據經驗來定，與空氣濕度有關，一般通過拿起研棒時勻漿下滴的情況來判斷，越稠越難下滴。勻漿的稀稠除影響板的平滑外，也影響板涂層的厚度，進一步影響上樣量。涂層薄，點樣易過載；涂層厚，顯色不那么明顯。通常，板的質量對薄層鑒別的影響不是很，影響最大的是展開劑的配制和展開系統的飽和。