TLC法是測定黃曲霉毒素的經典方法，是中國測定食品及飼料中AFT黃曲霉素B1(AFB1)的標準方法之一（GB/T5009.23-2006）。其原理是針對不同的樣品，用適宜的提取溶劑將AFB1從樣品中提取出來，經溶劑萃取純化，再在薄層板上層析展開，分離，利用AFB1的熒光特性，根據熒光斑點的大小和強弱，比較測定黃曲霉毒素含量。
TLC有單項展開法和雙向展開法，TLC法由于設備簡單，易于普及，所以國內外仍在使用，但由于該法樣品前處理繁瑣，且提取和凈化效果不夠理想，提取液中雜質較多因而在展開時影響斑點的熒光強度，而雙向展開雖避免了雜質干擾，增加了靈敏度，但增加了操作步驟和時間。