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  • 發布時間:2019-03-28 22:29 原文鏈接: 蛋白質分離實驗_分離已知pI的蛋白質

    實驗材料

    含10 mg蛋白質/ml 的溶于水的樣品

    試劑、試劑盒

    緩沖液(pH>pI)

    儀器、耗材

    50 μm 內徑的未包被的融合硅毛細管柱CE 儀器

    實驗步驟


    1. 用 pH 高于蛋白質的pI的 5 mmol/L 緩沖液 1/10 (V/F) 稀釋蛋白質樣品,使蛋白質(終濃度 = 1.0 mg/ml) 產生電荷。另外,也可在 5 mmol/L緩沖液中透析樣品(在 1 mg/ml的濃度下)。


    2. 用 50 mmol/L 同樣緩沖液充滿未包被的柱子。


    3. 流體動力學地注射樣品,如 1 lb/in2 的壓力 3 s。


    4. 用以下條件進行分離:


    探測波長:200 nm

    溫度:25℃

    運行電壓:25 kV

    運行時間:30 min

    展開


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