蛋白質測定方法

蛋白質測定方法一般來說，有以下五種：凱氏定氮法，雙縮尿法（Biuret法）、Folin－酚試劑法（Lowry法）、紫外吸收法和考馬斯亮藍法（Bradford法）。

表 五種蛋白質測定方法的比較

從以上表格中可以得出，不同的方法有不同的特點和優勢，如紫外吸收法測定時間快。但是綜合起來，最后一種考馬斯亮藍法(Bradford法)效率最高，無 論是測定時間，靈敏度還是受干擾程度，都是比較占優勢的。

下面，我們來重點介紹一下其中一種蛋白質測定方法--凱氏定氮法。

凱氏定氮法（Kjedahl法）

首先將濃硫酸倒入樣品中，邊倒邊搖晃，以使濃硫酸與樣品充分接觸，然后加熱試劑。如果你需要加快實驗進度，可以加入CuSO4作催化劑，這樣，實驗的反應時間就會大大縮短。CH₂COOH和H₂SO₄反應生成氨氣，然后氨氣又與H₂SO₄發生作用，固定了氮元素。這時我們得到了(NH₄)₂SO₄的溶液，然后我們可以用NaOH去跟硫酸銨反應，通過計算NaOH的使用量，就可以計算出氮的含量。下面是整個定氮法中發生的化學反應。

CH₂COOH+ 3H₂SO₄ = 2CO₂ + 3SO₂ +4H₂O +NH₃    (1)

2NH₃ + H₂SO₄= (NH₄)₂SO₄                       (2)

(NH₄)₂SO₄ + 2NaOH =2H₂O +Na₂SO₄ + 2NH₃        (3)

當我們得到氮的含量以后，我們就可以通過一定的計算，最終算出蛋白質的含量。

凱氏定氮法常用于有機化合物中的氮含量的測定，是蛋白質含量測定的經典方法，雖然在測試過程中，試劑用量很大，但是，不可否認，它所適用的樣品范圍之廣，測試結果之精確，都是公認的。

現在，隨著科技的發展，我們已經研究出帶消化爐的凱氏定氮儀，它把定氮過程中的前兩步驟通過儀器完成，方便了整個過程的實施。凱氏定氮儀能夠自動的對樣品 進行消化，然后蒸餾，智能化完成，節省了時間和精力，提高了工作效率。這種蛋白質測定方法具有有準確、快速、簡便、低耗、穩定的優點。