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  • 發布時間:2021-06-09 16:20 原文鏈接: 血小板功能檢測及臨床應用中應注意的問題

    血小板功能與血栓的形成有著密切的關系。人類對血小板功能的認識已有近百年的歷史,開展血小板功能檢測也有50年以上的歷史。血小板功能檢測在血小板的基礎研究、出血性臨床診斷和治療、抗血小板藥物研發及血栓性疾病研究等方面都發揮了巨大的的作用。因此臨床醫師尤其是心血管、神經科醫師迫切期望通過血小板功能檢測指導臨床對血栓類疾病預防和治療。近年來血小板功能檢測在臨床血栓病防治研究和臨床實踐中取得了一些成績,但所發揮的作用遠遠沒到達到預期效果。為此筆者根據多年血小板功能檢測經驗對目前臨床血小板功能檢測中的問題進行分析。希望有助于提高血小板功能檢測結果質量和對臨床工作的指導價值。筆者認為血小板功能檢測及臨床應用應特別注意以下幾個方面問題。

        1.樣本的準備和處理中的問題

        由于血小板本身穩定性較差,在樣本采集中一些簡單的因素就可導致血小板功能水平較大的改變:如溫度、震蕩、放置時間、采血過程、抗凝管及抗凝劑的質量等可以使血小板功能改變與體內不同,此外被檢者特殊狀態如婦女經期、用藥(含阿司匹林感冒藥、一些中成藥)等也可以導致血樣中血小板功能短期異常。因此在采血和準備樣本時要控制好血樣中血小板的穩定性,注意確保血樣中血小板功能狀態盡量保持與體內狀態一致,并充分了解被檢者可能導致血小板功能異常的因素,是確保檢測結果真實和有效的重要條件。而在實際工作中常常忽略血樣中血小板影響因素。在血小板功能檢測血樣準備時應特別注意如下事項:

        1-1 采血時間必須是空腹或在餐后2小時以上。

        1-2 被采血者采血前應處于比較平靜狀態,激烈運動后應適當休息待心跳、脈搏正常后方可采血。

        1-3 采血應在24±2℃環境中進行采血和檢測,即最好現場采血現場檢測,切忌采血后低溫傳遞血樣,且檢測時室內溫度應至少預先一小時達到并始終控制在24±2℃。 

        1-4 采血使用的采血針、真空枸櫞酸采血抗凝管應在采血前放置在22℃恒溫2小時以上,且在采血前應將真空管內抗凝劑在管內顛倒使抗凝劑侵潤全部管內部,血樣采集后采血管應放置在24±2℃環境中保存。

        1-5 應選用內腔壁光潔度高、采血后死腔小的真空枸櫞酸抗凝采血管。

        1-6 注意控制采血量,盡量與采血管規定量一致,采好血后立即輕柔顛倒采血管2-3次,使抗凝劑充分混勻。采集后的血樣禁止震蕩、劇烈混勻。

        1-7充分了解可能導致被檢者血小板功能異常的其它因素。

        2.選擇準確、穩定的血小板功能檢測儀器、方法并注意儀器檢測過程的標準化
    檢測儀器是檢測工作的關鍵和保證檢測結果準確的重要因素。對于血小板功能檢測目前國內外有多種儀器(方法)投入市場。應用于臨床血小板功能檢測的儀器(方法)應滿足以下要求。

        2-1儀器檢測變異系數(CV)值必須小于8%,當然CV值越小越好。儀器CV越小越能夠準確指示樣本中血小板功能水平,減少臨床誤判。

        2-2儀器要具有質控體系:可以確保檢測結果的可信度及標準化。

        2-3 檢測應使用全血直接檢測、樣本處理必須簡便,避免繁瑣制備過程對血小板功能改變,也有利于提高檢測的效率。此外用血量還應盡量少(<1.0ml),一份樣品可以滿足多個測試需要。

        2-4 檢測儀器應是開放設計能夠方便地同時應用多種誘聚劑檢測,檢測獲得的信息可以比較全面地反映血小板的功能水平;

        2-5此外儀器檢測原理合理、檢測信號直接、技術成熟穩定;

        2-6 檢測成本不宜過高。

        3.血小板功能檢測方案

       有了可靠的儀器、標準化操作、做好樣本采集和處理的控制,可以初步滿足血小板功能檢測結果準確的要求,但這還不夠。孤立的單次血小板功能檢測對臨床幫助是有限的!一個有效的血小板功能檢測必須是一個合理的連續和全面的多參數檢測方案,尤其對于長期使用抗血小板藥物的患者特別需要多參數檢測。血小板功能活化的表面受體有許多種,包括花生四烯酸受體,ADP受體,膠原受體,凝血酶受體,腎上腺素受體和VWF等,任何一種受體被激活后都可以導致血小板啟動血栓形成過程。加之血小板的生命周期僅約10天以及長期用藥可能引起的耐藥因素等,因此對血小板功能檢測應是多種受體通道同時和定期動態跟蹤檢測,才能比較全面和及時地反映體內血小板的真實功能水平。否則,血小板功能檢測信息將是不完全和滯后的,其指導意義顯然也將是十分有限甚至可能誤導臨床工作。合理的、標準化的血小板功能檢測方案應包含以下幾個方面。

        3-1 檢測項目設計及誘聚劑的選用

        由于血小板表面與聚集功能相關受體種類較多及個體差異,單純一種誘聚劑檢測的結果不一定能全面地反映被檢者體內血小板功能真實水平。盡管選用單一誘聚劑可以有針對地檢測相應藥品使用后的有效性,例如在應用阿司匹林有效的患者用花生四烯酸誘聚劑檢測時可以反映血小板花生四烯酸受體的抑制。常常服用阿司匹林患者樣本用花生四烯酸檢測時表現為該項聚集率特別低,甚至大大低于正常人參考值的低限!而同時檢測其它受體若不同時表現出較低的血小板功能狀態,此時被檢測者一般并無出血風險。但若其它誘聚劑檢測指標偏高將仍然可能有形成血栓的風險。這說明單純一種誘聚劑檢測的結果不能全面地反映或代表被檢者血小板全面功能水平和體內真實的功能狀況。因此,在指導臨床預防和治療應用時應當要選擇二種或二種以上的誘聚劑檢測,根據幾種誘聚劑檢測結果進行綜合判斷,才可能獲得比較全面、真實的血小板功能水平狀況。對于使用阿司匹林藥物患者的血小板功能評價,推薦使用花生四希酸(AA)進行檢測主要判斷藥效,但同時還必須選用膠原(Col),甚至加選其它誘導劑分別同時檢測,根據多項檢測結果全面判斷血小板功能水平。

        同樣道理對服用氯吡格雷患者建議選用二磷酸腺苷(ADP)和膠原或其它誘聚劑分別同時進行檢測。對于聯合使用氯吡格雷和阿司匹林的患者,應該分別同時選用花生四烯酸、膠原、ADP或其它誘聚劑同時進行檢測。單項誘聚劑檢測一般只適合應用于單品種抗血小板藥物效應評價,而不能簡單地作為對血小板功能水平全面的反映,尤其是對于長期使用抗血小板藥物及已發生血栓病患者。

        3-2 對于風險人群血小板功能檢測應該在規定時間內重復檢測
     
        血小板的生命周期約為10天,因此,體內血小板及血小板的功能不是長期恒定不變的。此外,由于長期的藥物刺激,體內血小板功能由于藥品或其它因素影響導致改變的可能性也一定存在。因此,對于高風險個體,應每個月進行一次血小板功能檢測,而且每次檢測應該是多項誘聚劑同時檢測!單純依據一次性檢測指導長期用藥是不合理的。

        4 血小板功能檢測結果對臨床應用建議

        血小板功能水平的判斷必須是不少于三項檢測結果綜合評價,并根據多項檢測指標判斷結果進行用藥方案調整。對于有血栓形成風險患者,檢測結果中如有一項指標在高值區域,就應關注并通過調整用藥盡量將患者所檢測血小板功能指標都控制在參考范圍的中值或以下。即單一指標降低,并不完全意味著血小板功能水平被全面有效抑制。只有多項指標全部均控制在中值或以下時對于預防和治療血栓性疾病的患者才是比較有效和安全的。

        同理對于有出血傾向患者,應注意重點防止血小板功能過低狀態,控制各項指標檢測結果趨近中值或中值偏上的區域,多項檢測結果中僅單項檢測指標偏低一般無出血風險。

       總之,在臨床血小板功能檢測中如果注意上述環節,血小板功能檢測的結果才能夠為臨床提供真實有效的信息。

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