1． 臨床意義
心肌梗塞、腦血管血栓形成、深靜脈血栓形成、腦栓塞和肺栓塞等血栓性疾病在中國有很高的發病率，也是致死的重要原因。血小板活化是血栓形成的重要環節，檢測血小板的活化狀態可輔助診斷和監控血栓性疾病，對判斷血栓前狀態意義也非常重大。
2． 檢測原理
靜止狀態的血小板內分布著多種顆粒，如a顆粒、溶酶體顆粒等。這些顆粒表面存在著一些特定蛋白，如a顆粒表面有CD62p抗原，溶酶體顆粒表面有CD63抗原。血小板活化時，由于顆粒膜蛋白與血小板膜蛋白相互融合，使顆粒膜蛋白翻轉到血小板膜表面。因此，可通過檢測這些顆粒膜蛋白來判斷血小板的活化狀態。
3. 采血
EDTA抗凝采血，取后段血。因前段血中可能有組織液存在，造成人為血小板活化。
4. 試劑選擇
FITC標記的CD42b抗體
PE標記的CD62p或CD63抗體
在血小板膜表面穩定表達的抗原有CD41/CD61(GPIIb/IIIa)和CD42a, CD42b等，這些抗原均可作為血小板的標志。但因中國存在著一部分血小板無力癥患者，其血小板表面缺乏CD41/CD61(GPIIb/IIIa)。因此，一般使用CD42b來鑒別血小板。
因一般情況下，CD62p和CD63的表達率均較低，需用PE等熒光較強的熒光素標記檢測。
5. 染色
a. 全血法：
1) 取試管A(陰性對照)和試管B(測定管)，均加入5ml 抗凝全血和200ml PBS
2) A管中加入適量的CD42b-FITC和陰性對照抗體(對應于CD62-PE或CD63-PE)
B管中加入適量的CD42b-FITC和CD62-PE或CD63-PE抗體
3) 室溫，避光孵育25分鐘
4) 加2 ml PBS，上機檢測
血小板在體外隨著時間的延長會自發活化，所以由采血到檢測一般要在3小時內完成。
b. 固定法：
1) 抗凝全血 800rpm 離心10分鐘，取上清液即PRP(富血小板血漿)
2) 以等體積1-2%的多聚甲醛固定 10分鐘
3) PBS洗滌1次，用PBS調節細胞濃度為 1×107個/ml左右
4) 分別在試管A(陰性對照)和試管B(測定管)進入100ml血小板懸液
5) A管中加入適量的CD42b-FITC和陰性對照抗體(對應于CD62-PE或CD63-PE)
B管中加入適量的CD42b-FITC和CD62-PE或CD63-PE抗體
6) 其余步驟同全血法
固定法可避免血小板在體外因時間或操作造成的人為活化，固定后的血小板可在5天內檢測。
而固定法的步驟較為繁瑣，耗費時間，且在制備PRP時需離心，容易帶來人為活化。所以很多實驗室還是傾向于全血法。但是如果采血后不能立即檢測(3小時內)，則需用固定法。
6. 分析
1) 用CD42b表達量和側向散射光設門來選定血小板
選定血小板過去常用的方法是FS(C)/SS(C)設門，根據細胞的大小與顆粒度來確定血小板。然而血小板的大小不一，有些血小板較大，容易與紅細胞相混淆，尤其當活化時，血小板與白細胞發生粘附，在FS(C)/SS(C)圖上進入白細胞群，使得一部分血小板丟失，因此應用該法對血小板進行選定不夠準確。
目前公認的方法是用血小板特異性標志來選定血小板，因無論血小板大小，無論其是否活化，均穩定表達CD41/CD61(GPIIb/IIIa)和CD42a等，因此可以非常精確地區分血小板。
2) 做陰性對照管，調節陽性區的假陽性率為1-2%
3) 做測試管，得出CD62p的表達率，及血小板活化的百分率.