實驗原理
在受檢血漿中加入足量的凝血活酶和鈣離子,測定血漿凝固所需的時間,即為血漿凝血酶原時間(PT)。本試驗是外源性凝血系統凝固的篩檢試驗。
三、實驗方法
材料:
1.水浴箱、滅菌注射器、硅化試管或塑料試管、離心機、秒表。
2.25mmol/L氯化鈣凝血活酶試劑。
3.正常人凍干混合血漿。
4.109mmol/L枸櫞酸鈉溶液。
方法:
1.硅化試管或塑料試管中加入109mmol/L枸櫞酸鈉溶液0.2ml,靜脈采血1.8ml加入上述試管中。充分混勻,3000rpm離心10min,分離血漿。
2.將氯化鈣凝血活酶溶液、健康人混合凍干血漿和待測血漿,置37℃水浴中預溫5min。
3.取試管1支,加入健康人混合凍干血漿0.1ml,37℃水浴中預溫30s,再加入預溫的25mmol/L氯化鈣凝血活酶溶液0.2ml,混勻,開動秒表計時。
4.不斷地傾斜試管至液體流動緩慢趨于停止時,終止計時,記錄所需時間。重復測定2~3次,取其平均值。
5.同樣方法測定待測血漿的凝血酶原時間(重復測定2~3次,取平均值)。
四、實驗結果計算
11~13s(超過正常對照3s有意義)
五、注意事項
1.使用對凝血因子無激活作用的塑料制品或硅化的玻璃器皿采血。
2.采血要順利,抗凝要充分,采血后仔細檢查標本有無溶血、黃疸和凝血塊,任何微小的凝塊都會影響測定結果,必須重新采血。
3.采血后宜在1h內完成測定,4℃冰箱內保存不應超過4h。
4.水浴溫度控制在(37.0±0.5)℃,溫度過高或過低都可影響測定結果。