HiCN是目前血紅蛋白各種測定法中最準確的方法,除HbS、HbC外其他血紅蛋白均可轉化成HiCN,本文介紹試劑為國際血液學標準化委員會(ICSH)所推薦。由于HiCN的毫摩爾吸光系數得到國際公認,故可用經嚴格校準的高級分光光度計根據吸光系數直接計算,此種計算并非檢驗科常規方法。其計算公式如下:
表示540nm測得吸光度,251為血液稀釋倍數,11.0為Hb分子單體毫摩爾吸光系數,1.0是光徑,16114.5是單體分子量,除1000即由毫克(mg)換算為克(g)。
稀釋液應貯存于棕色玻璃瓶中,不得貯存于塑料瓶中,否則氰離子吸附于塑料瓶壁,使測定結果偏低。
稀釋液含氰化鉀,切勿用口吸液。測定后廢液應加入等量水稀釋,并按每升加次氯酸鈉溶液35ml,混勻,敞開容器,放置一夜后排入下水道。
血紅蛋白測定尚有多種方法,目前所報道的方法均未建立本身的標準物,采用此類方法務請慎重,須以HiCN法為參考法進行評價后方可使用。尤須注意現在市售血紅蛋白質控液均為HiCN法質控液,用于其他方法會有明顯偏倚。