實驗材料 血液
試劑、試劑盒 消毒酒精瑞特染色液蒸餾水
儀器、耗材 載玻片蓋玻片脫脂棉刺血針油鏡用油顯微鏡
實驗步驟
一、血涂片的制備
按以下各步驟進行操作。
(一)采血
采血之前先揉搓需要采血的部位,如耳垂或手指尖,使血流旺盛。用酒精消毒皮膚,待干。以左手拇指及食指夾持局部,再用消毒過的刺血針刺之,血液自然流出。如血流不暢,可輕輕擠壓用消毒棉擦去第一滴血。
(二)涂片
沾一點流出的第二滴血于干凈載玻片的右端,用另-載玻片作為推片之用。將此推片的末端斜置于第一塊載玻片上的血滴的左緣,成30o~40o度角。將推片稍向后退,使之與血滴圖接觸,這樣,血即向推片末端的兩邊伸展,并在兩載玻片之間的斜角中充滿。此時把推片向前推動,血隨推片而行,即涂成血片(圖2、圖3)。
推片時應保持一定的速度和兩片間的角度,要連續推進,不要中斷。血片的厚薄,可由血滴大小、推片速度和兩片之間的角度大小來調節。血滴小,推進速度慢,推片角度小,涂片薄;反之,則厚。厚的涂片適于做白細胞分類,容易找到白細胞。
(三)染色
待血片干燥后,滴數滴瑞特染液(配方:瑞特染料0.1 g溶于60 ml甲醇中)在血片上,使血片全部被染液淹蓋。約1 min后,滴加相當于染液1.5倍的緩沖液或蒸餾水。