血液分析儀與手工法計數兒童血小板誤差原因分析

　　隨著醫學研究的發展及各種高科技技術在細胞生物學領域的應用,血液分析儀已經成為各級醫療機構常規實驗診斷中不可缺少的儀器,具有快速、方便、所測項目多等諸多優點,但由于設計原理的問題,某些情況下易造成結果的假性增高或減低。在日常工作中發現,血細胞分析儀計數的兒童血小板(platelet,PLT)值高于正常參考范圍的較成人偏多。我們隨機分析了日常工作中使用MEK-6108型血液分析儀測得的600例血小板值,其中,成人(14歲以上)400例,兒童(14歲及以下)200例。并對兒童的標本同時用KX-21型血細胞分析儀和手工光學顯微鏡法計數血小板值。 
　　1 材料與方法 
　　1.1 儀器和試劑 
　　血液分析儀采用日本光電公司生產的MEK-6108型和日本東亞醫用電子株式會社生產的KX-21型;稀釋液、溶血劑等均使用各自配套試劑;光學顯微鏡計數血小板稀釋液由實驗室自配。 
　　1.2 標本的采集 
　　采用EDTA-2K抗凝的真空管,嚴格按規定要求(抗凝劑與血液比例嚴格控制、血流要順暢)采集靜脈血,標本要求無凝塊和溶血。采集后在15 min～1 h測試完畢。 
　　1.3 方法 
　　400份成人標本只用MEK-6108型分析儀測定。200份兒童標本分別用兩種儀器進行測定,且各測定兩次取其平均值,同時用光學顯微鏡法計數其血小板值,每份標本計數兩次取其平均值。各儀器操作嚴格按說明書要求,手工法采用改良許汝法,按《全國臨床檢驗操作規程》要求進行。 
　　2 結果 
　　MEK-6108型血細胞分析儀所測的400例成人血小板值高于正常參考上限(300×109/L)者占6%,200例兒童血小板值高于正常參考上限(300×109/L)者占21%,兒童高于成人。 
　　MEK-6108和KX-21兩種血細胞分析儀測得的兒童血小板值分別為(204.0±80.5)×109/L、(194.0±71.2)×109/L,兩者經統計學處理,無顯著性差異(P>0.05)。MEK-6108測得的值[(204.0±80.5)×109/L]與手工顯微鏡計數值[(190.0±65.3)×109/L]比較,無顯著性差異(P>0.05)。 
　　將MEK-6108血液分析儀分析時出現異常報警(URI)的28例標本的血小板值[(486.0±98.7)×109/L]與顯微鏡計數的結果[(279.0±76.5)×109/L]進行比較,有顯著性差異(P<0.05)。 
　　3 討論 
　　不同的血液分析儀雖然有不同的生產廠家,且分析原理及試劑有所不同,但在分析時只要按其要求操作,所取標本合格、操作時間控制在一定范圍內(15～60 min),所得的血小板結果無明顯差異[1],筆者的結論也與之相符。 
　　血液分析儀所測得的血小板值高于正常參考上限的兒童多于成人,考慮可能有以下幾方面原因:①某些疾病如肺炎、支氣管炎、溶血性貧血、川崎病、上呼吸道感染、哮喘喘息發作期、腎病綜合征等疾病可引起血小板增高,這可能與血小板活化參與其發病機制有關[2],而這幾種疾病兒童的發病幾率要大于成人。②在采集兒童靜脈血液時由于兒童與工作人員難以很好地配合,采集到的標本很容易造成紅、白細胞破壞形成碎片。由于血液分析儀對血小板的測定是與紅細胞在同一個計數池中進行,其原理是在一定體積(2～24 fl)范圍內的顆粒被計數為血小板[3]。當所測標本中有大量小紅細胞或紅、白細胞碎片,其體積進入血小板計數范圍的被誤認為血小板,使血小板計數假性增高[4]。③兒童多有厭食、偏食等不良飲食習慣,易發生營養不良性小細胞貧血,如缺鐵性貧血。④有少數兒童在生理狀況及操作因素的影響下其血小板本身就高于正常。 
　　因血球計數儀具有“浮動界標”糾正功能,并非只要當血液標本中存在小紅細胞時就可以使計數的血小板值偏高于實際值,即使其體積<20 fl,也不至于影響血小板計數,只有當多量的小紅細胞存在時,超出其功能糾正范圍才出現錯誤結果[4],并且當出現此類錯誤時儀器一般會有URI報警提示,URI報警即提示小紅細胞或紅細胞碎片會對血小板計數有影響而造成計數誤差,血小板直方圖也會出現異常的表現,其曲線尾部并不是呈下降趨勢與橫坐標相交,而是呈上升走勢。 
　　平均紅細胞體積(MCV)是反映體內紅細胞大小的一項指標,當血液內小紅細胞數量增多時,MCV值就會低于正常參考值,而小紅細胞數量增多到一定數量時又會影響血球計數儀對血小板計數的準確性,故而MCV值也可間接判斷血球計數儀所計數血小板值的準確與否。和強等[2]報道MCV<70 fl時對血小板計數有影響,我們所分析的28例異常血小板直方圖標本中有26例MCV<70 fl,與報道的基本一致。 
　　鑒于上述結果,筆者建議在使用血細胞分析儀計數兒童血小板值時,并不需要每一標本都進行手工顯微鏡計數,即使其結果高于正常參考范圍。但只要當出現下列情況之一時,就必須用人工顯微鏡計數加以補充,以得到準確的結果:①血小板計數有警示信號(URI);②MCV<70 fl,且RBC直方圖顯示有<50 fl的小紅細胞存在;③血小板直方圖曲線呈齒狀,表示有血小板聚集,此時血小板計數儀器法測得的結果偏低。