健康人的血液是無菌的，當人體局部感染向全身播散和出現全身感染時，血液中可出現細菌，依程度不同分為菌血癥、敗血癥或毒血癥。當細菌侵入骨髓可引起嚴重的骨髓炎。盡早確立診斷是良好預后的關鍵，而把握送檢指征是早期診斷的最好保證。
一、[送檢指征]
1.癥狀指征：發熱；皮疹；肝脾腫大；關節疼痛；神志昏迷或休克
2.疾病指征：化膿性病灶或損害；粘膜損傷性疾病；肝臟疾病；糖尿病；血液疾病及惡性腫瘤；艾滋病；呼吸道感染或呼吸衰竭；長期輸液或導管介入疾病；血液透析患者；
3.重癥監護病房患者的血流易感性：重癥監護病房是醫院內各科危重患者集中的病區，ICU病房肺炎的發生率高達30%以上，泌尿系感染高達20%以上，臟器功能衰竭約占50%，死亡率可達23.6%。這些患者的免疫力重度下降，任何部位的局部感染都將導致血流的播散，因此對于ICU病區患者及時的血液培養是降低ICU死亡率的有效途徑。
4.骨髓培養：骨髓培養和血液培養的送檢指征是基本一致的，但由于抽取骨髓不易被患者接受，且操作手續較血液繁瑣，所以常規血液感染有指征時以抽取血液培養為主。但當骨髓炎時或長期使用抗菌藥物患者，抽取骨髓培養陽性率會遠高于血液培養。
二、[標本采集]
1、采集時間
(1).一般原則：一般情況下應在病人發熱初期或發熱高峰期時采血。原則上應選擇在抗菌藥物應用之前，對已用藥而病情不允許停藥的患者，也應在下次用藥前采集。細菌的分離陽性率與采集的頻率和部位有一定的相關性，在成人中，菌血癥時非常低的，因此增加采樣的頻率和改變由一個部位采樣而變為多部位采樣，將會提高血液培養的陽性率。
(2).布魯桿菌感染：最易獲得陽性培養的是發熱期的血液或骨髓。除發熱期采血外，還可多次采血，一般為24小時抽3---4次。
(3).沙門菌感染：根據病程和病情可在不同的時間采集標本。腸熱癥患者在病程第1—2周內采集血液，或在1—3周內采集骨髓時最佳時間。
(4).亞急性心內膜炎：除在發熱期采血外，應多次采血。第一天作三次培養，如果24小時培養陰性，應繼續抽血3份或更多次進行培養。
(5).急性心內膜炎：治療前1—2小時內分別在3個不同部位抽血樣，分別進行培養。
(6).急性敗血癥：腦膜炎，骨髓炎，關節炎，急性未處理的細菌性肺炎和腎盂腎炎除在發熱期采血外，應在治療前短時間內與身體不同部位采血，分別作需氧和厭氧血液培養。
(7).不明原因發熱：可于發熱周期內多次采血作培養。如果24小時培養結果為陰性，應繼續采血2—3份或更多次血樣本作培養。
(8).肺炎鏈球菌感染：最佳時機是在寒戰，高熱或休克時，此時采集的樣本陽性率較高。
2、標本采集
防止皮膚寄生菌或環境微生物引起的污染是血培養的關鍵問題，臨床操作采血及將血液注入血瓶時應嚴格執行無菌操作程序。
（1）.成人采血容量以每瓶8~10ml為宜。兒童和嬰幼兒分別采樣3~5ml和1~2ml不等，但必須使用相應的兒童培養瓶為好。血液樣本與培養基比例以1：10為宜，骨髓采集量一般為1~2ml。標本量越大，檢出率越高，但抽血量過大時，容易出現假陽性。
[報告方式]
1.血液及骨髓培養應建立三級報告制度。
1第一級報告：當疑有細菌生長時，應以無菌操作挑取培養液作涂片，革蘭染色鏡檢。鏡檢一旦見有細菌生長，并可排除污染細菌時，應立即轉種培養瓶內培養物于血瓊脂平板、中國藍平板或巧克力平析培養。同時取血液混懸液根據涂片所見選藥直接做K-B法藥敏試驗。并將鏡檢結果報告臨床醫生，與臨床勾通并做好記錄。
2第二級報告：測量直接藥敏結果，同時根據培養出的菌落涂片情況、進一步確定細菌的類型，并將結果立即通知臨床醫生并做好登記。
3第三級報告：將分離出的細菌進一步作鑒定和正式的藥敏試驗，復合初步報告所得結果為最終結果。報告“培養出×××菌”。
2.若培養7天仍無細菌生長者，報告無菌生長。
4.臨床診斷為亞急性細菌性心內膜炎者，可繼續培養至2周再發出陰性報告（自動血培養儀可在7天作出陰性報告）。
[臨床意義]
現代臨床醫學的發展，光譜、超廣譜抗生素的廣泛使用，使耐藥菌株增加，院內感染率上升，血液培養中分離出各種微生物種類顯著增多，以前認為致病、條件致病或非致病菌的界限現在已不再如此絕對區分。厭氧菌感染菌血癥占菌血癥的5%--15%，有6%--15%的菌血癥患者是混合菌感染，長期使用抗菌藥物患者常常出現L型細菌，免疫力低下患者常發生真菌血癥。因此對于每一種從血液培養分離出的細菌有必要重新認識它的臨床意義。
（一）葡萄球菌
葡萄球菌屬于微球菌科，自1989年至今已知葡萄球菌屬包括28個種，其中有14個種可從人類臨床標本中分離到。以血漿凝固酶作為分離標準可將其分為二大類：
1.金黃色葡萄球菌是引起人類感染的最主要的葡萄球菌，占葡萄球菌菌血癥的90%。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌或耐苯唑青霉素的金黃色葡萄球菌（MRSA）常呈多重耐藥，即使有最有效的萬古霉素治療，其死亡率仍可達10%--30%，甚至可達50%。葡萄球菌還可引起中毒性休克。
2.凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）關于CNS的致病性問題爭論很多，以前認為從血液培養中分離出凝固酶陰性的葡萄球菌大多是污染菌，但實際上在葡萄球菌菌血癥的患者中有10%是由于凝固酶陰性葡萄球菌所致。這些患者大多數時患有先天性疾病的抵抗力低下者或是應用化學治療劑、類固醇制劑、放射治療而引起機體防御功能低下者。凝固酶陰性的葡萄球菌目前已成為心內膜炎的主要致病菌，尤其隨著心臟外科手術的進展，由本菌引起的心內膜炎有上升的趨勢。其耐藥性比凝固酶陽性的金黃色葡萄球菌更高，特別是耐苯唑青霉素的凝固酶陰性的葡萄球菌（MRCNS）其耐藥性更高，常造成臨床治療上的困難。
據文獻資料報道，凝固酶陰性的葡萄球菌敗血癥死亡率為14%。
（二）鏈球菌
1.A群鏈球菌是引起化膿性感染的主要菌種，致病力強，也是引起敗血癥的主要菌株之一。
2.B群鏈球菌又稱無乳鏈球菌，近十多年來由該菌引起的新生兒敗血癥不斷上升，其原因可能是由于婦女陰道中的B群鏈球菌帶菌率高，從而使新生兒在產道感染B群鏈球菌的機會增加。
3.草綠色鏈球菌是亞急性細菌性心內膜炎的主要致病菌。此類鏈球菌常定居在扁桃體、鼻咽部或牙齦中，可發生局部病灶性感染。在拔牙或切除扁桃體時細菌侵入血流，如心臟有病變，細菌停留在損傷部位，并開始增殖而引起亞急性細菌性心內膜炎。
4.肺炎鏈球菌是人體口腔、鼻咽部的正常菌群，并不會引起疾病。當機體抵抗力下降時，可引起大葉性肺炎、支氣管肺炎，如處理不當可導致血流播散，而導致敗血癥。
（三）腸球菌是醫院內感染中常見病原菌之一。引起人類感染的主要是糞腸球菌，其次是屎腸球菌和鳥腸球菌，為近年來急性心內膜炎的病原菌之一。腸球菌對抗菌藥物耐藥性很高，特別是慶大霉素高耐藥株。如藥敏報告提示是高耐慶大霉素腸球菌，即提示青霉素類抗菌藥物不能與氨基糖苷類抗菌藥物聯合用藥。萬古霉素是高耐腸球菌的首選藥物。腸球菌敗血癥平均死亡率可達25%。
（四）革蘭陰性桿菌 在常規血液培養中革蘭陰性桿菌引起的菌血癥約占71.4%，所分離菌種類與局部感染病灶有關，敗血癥的平均死亡率為25%。常見的感染菌有：沙門菌、大腸桿菌、氣單胞菌、布魯菌、沙雷菌、銅綠假單胞菌、不動桿菌、嗜麥芽窄食單胞、流感嗜血桿菌等。
（五）真菌 真菌血癥常發生于重癥疾病的晚期，特別是應用廣譜抗生素和皮質激素后，如白血病、粒細胞減少癥、再生障礙性貧血、癌癥、結核和艾滋病人。由于機體免疫功能低下，在原發病灶加重的同時，常發生繼發感染及二重感染。任何部位，尤其是正中靜脈插入或留置導管均可引起真菌感染。所分離出的病原真菌以白色假絲酵母菌為主。
[注意事項]
1．一般應在抗菌藥物使用前采集血液標本。
2.嚴格作好采血部位及血培養瓶瓶塞的消毒，嚴格要求無菌操作，防止污染。
3.如用BacT/Alert血液分析系統時，不能用碘酒消毒瓶蓋，只需75%酒精消毒瓶蓋。
4.成人血液培養瓶每瓶接種不超過12ml，兒童不超過7ml，新生兒不超過5ml，血量過大可能出現假陽性。
5.注入標本后的血培養瓶應立即送往細菌室，最遲不超過2小時。如因某種原因不能立即送檢時，應將已經接種樣本的培養瓶放在室溫，切勿放冰箱存放，防止細菌死亡。
6.嚴格防止標本次序混亂，按一人一瓶一單原則，每作一患者培養立即將化驗單邊條貼在培養瓶上或將可撕條碼貼在相應化驗單上，嚴禁多個患者同時采樣，流水操作的工作作風，因為采樣錯誤將會導致醫生錯誤診斷，甚至危及病人的生命。
7.同時作厭氧培養和需氧培養時，應先將降標本接種到厭氧瓶中，然后再注入需氧瓶，嚴格防止將空氣注入厭氧瓶中。
8.采集標本用的針頭、注射器及廢棄培養瓶必須經高壓滅菌后才能丟棄，因為菌血癥患者血標本中的微生物可成為傳染源。
9.采用后的血培養瓶在送往細菌室的過程中，如天氣寒冷應采取一定的保暖措施。
10.應在化驗單上標明準確采樣時間。