血液成分病毒滅活與安全輸血

辛永紅，劉 強，鄭秀峰 2006-4-25 21:36:42 《實用醫技雜志》 2006年1月 第5卷 第1期 關鍵詞：血液

    輸血是臨床上治療和搶救病人常用的醫療措施。近年來，隨著醫療技術的不斷進步，安全輸血越來越受到人們的重視。輸血安全不僅是輸血醫學和臨床治療學追求的期望目標，也是采供血機構和醫療機構乃至社會各界共同關注的熱點和極端敏感的永恒課題。

    1  輸血存在的風險

    1．1  主要表現  輸血除能治療患者外，也可能引起不良反應(輸血免疫反應)、并發癥和輸血相關的傳染病(病毒、細菌感染、梅毒和瘧疾等)，尤其是有多種病毒(HIV1/2、HTLVI/II、肝炎病毒HBV和HCV、HDV和HEV、HAV、非甲戊肝炎病毒(a)HGV(b)TTV(c)SENV、CMV和EBV、小病毒B19和新克雅氏病毒)可經輸血傳播，引起輸血后病毒性傳染病。其中尤以脂質包膜致病病毒如乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)和艾滋病毒(HIV)危害最大，嚴重影響了人民的身心健康。

    1．2  影響因素  如病毒性疾病的“窗口期”、“免疫靜默感染”、“新型病毒和亞型變異株的出現”以及“包括核酸檢測在內的各類病毒標志物篩查方法學的局限性”等，使目前無法做到“輸血零風險”。

    2  輸血傳播的病毒性疾病的控制對策

    2．1  現行對策  控制輸血傳染病源頭的無償獻血；嚴格篩選血液，建立穩定可靠的病毒檢測手段；提倡科學、合理的用血。

    2．2  根本對策  血液制品病毒滅活；開發血液代用品。

   3  血液成分病毒滅活的方法

    3．1  血漿病毒滅活  多年來國外應用：巴斯德液態濕熱滅活法：血漿+保護劑60 ℃ 10 h；有機溶劑/洗滌劑(S/D)法：混合血漿+TNBP/Triton 100 30 ℃ 4 h植物油萃取或固相層析出S/D；膜過濾法：多層微孔復合材料等技術對大量的不同人份的混合血漿和各種血漿蛋白制品進行病毒滅活已取得明顯的效果(病毒滴度下降)，對脂質包膜(HBV、HCV、HIV等)和非脂質包膜(HAV、細小病毒、B19等)病毒均可滅活(濕熱滅活法)，或僅對脂質包膜病毒有效(S/D法)，同時蛋白結構無變化，凝血因子(V：C、Ⅷ：C、Ⅳ：C)回收率>75％，上述方法均已應用于大生產，但處理難度大，費用高，不能廣泛應用于臨床用單袋血漿(100 ml、200 ml)的病毒滅活。光化學法：亞甲蘭+可見光照射(MBP)。由于目前全國各地血站供臨床使用的血漿均為單人份血漿，其可能內含的脂質包膜病毒，對人體健康有危害。為了克服此危害，必須對脂質包膜病毒滅活。大量實驗數據證明，用亞甲蘭光化學處理血漿可完全滅活血漿內所含的VSV和Sindbis病毒。(這兩種病毒是國內外公認的血液制品病毒滅活有效性的指示病毒，其中VSV是HIV的模型病毒，Sindbis是HCV的模型病毒，均為RNA脂質包膜病毒。)病毒滴度下降>610 g TCID50，同時也表明血漿主要凝血因子(Ⅴ、Ⅷ、Ⅸ)的回收率>80％，白球蛋白的回收率>90％，血漿蛋白的免疫原性無變化。

    3．2  紅細胞病毒滅活  血卟啉、酞菁類化合物；酚噻嗪類化合物(MB、DMMB)；FRALE S303—pH調節。目前，在紅細胞制品病毒滅活的研究中，光化學方法越來越顯示出良好的應用前景［1］。

    3．3  血小板病毒滅活  硫堇+可見光照射；8甲氧補骨脂+UVA；S59+UVA。

    4  光化學方法滅活病毒的機制
    
    主要是依靠光敏劑在光照下產生的單線態氧或自由基氧化損傷病毒的分子結構，從而殺滅病毒。各種光敏劑的作用特點不盡相同，如補骨脂內酯衍生物主要產生自由基(一類機制)［2］，酞菁類光敏劑主要產生單線態氧(二類機制)［3］，而酚噻嗪類光敏劑可能同時涉及兩類機制，例如單線態氧和光敏劑介導的自由基可能都參與了亞甲蘭(MB)光化學處理對M13噬菌體的滅活［4］。

    5  病毒滅活的臨床意義

    輸血可以傳播疾病，特別是輸血過程中的艾滋病病毒感染更是令各國政府十分頭疼，艾滋病在全球的傳播已成為人類的一場災難，許多國家已把預防和控制HIV感染作為國家生死存亡的一項重大國策。如何防止輸血傳播的病毒性疾病，是當前輸血醫學和臨床醫學乃至社會各界共同關注的問題。但由于病毒標志檢查在方法學上的局限性(如感染早期，病毒血清標志物出現以前，現行的檢測方法不能將病毒檢出)、檢測病毒種類的局限性和新病毒不斷被發現，從而不能完全剔除攜帶致病病毒的血液。僅上海為例，每年有15萬人次～20萬人次接受輸血，其中約40％輸注血漿。目前全國供血量約為1 300萬單位(200 ml/單位)，若以中等發達國家輸血后傳染病發病幾率為0.2％計，其中回輸血漿后而感染者(乙肝、丙肝和艾滋病)估計有近百萬人，另據Klein(1998)報告血漿輸入的危險程度為10 000單位可發生7．5次不良反應，每1 000名接受輸血的病人中有3．7起不良反應發生。因此要從根本上控制和杜絕血源性的傳染病，除加強篩查以外，還必須對血液進行滅活病毒處理，才能達到輸血安全的目的。血液成分的病毒滅活是實現安全輸血的唯一途徑。

    6  展望

    實現安全輸血對提高人民群眾的健康水平具有巨大的社會效益，是每一位輸血工作者追求的崇高目標。目前，我國在血漿病毒滅活上已建立了成熟的方法，亞甲蘭熒光病毒滅活方法已通過了有關部門的鑒定，并已進入臨床使用；在紅細胞病毒滅活的研究上已取得突破性進展；血小板病毒滅活也已進入臨床實驗。相信在不久的將來，隨著NAT血液篩選技術的開展，血液成分病毒滅活方法的全面應用，我國的輸血傳染病的發病率會進一步降低，輸血作為一種救死扶傷的治療手段，將獲得真正意義上的全面的安全保障。

    參考文獻：

    ［1］  王飛，王憬惺.光化學方法滅活血液細胞成分中的病毒［J］.中國輸血雜志，1999,12(4):264.

    ［2］  Goodrich RP,Platz MS.The design and development of selective,photoactivated drugs for sterilization of blood products［Ｊ］.Drugs of the Future. 1997,22(2):159.

    ［3］  Rywkin S,Lenny L,Goldstein J,et al.importance of type I and type II mechanisms in the photodynamic inactivation of viruses in blood with aluminum phthalocyanine derivatives［Ｊ］.Photochem Photobiol,1992,56(4):463.

    ［4］  Abe H,Ikebuchi K,Wagner S J,et al.Potential involvement of both type I and type II mechanisms in M13 virus inactivation by methylene blue hotosensitization［Ｊ］.Photochem Photobiol,1997,66(2):204.