血液標本的采集和處理

　　血液標本的采集是分析前質量控制的重在環節，可分為毛細血管采血法和靜脈采血法。需要血量較少的檢驗，如手工法或半自動血細胞分析儀血細胞計數，常用毛細管采血法。需血量較多檢驗，如紅細胞比積、臨床生化檢驗、全自動血細胞分析血細胞計數一般用靜脈采血法。特別是全自動血細胞分析儀，無論儀器進樣品多少，為防止血樣中小凝塊的形成，保證儀器進樣時標本能充分混勻，原則上均應使用靜脈血。毛細血管血和靜脈血之間，無論細胞成分或化學組成，都存在程度不同的差異。在判斷和比較所得結果時必須予以考慮。

　　某些生理因素，如吸煙、進食、運動和情緒激支等，均可影響血液成分。甚至一日之間，白細胞總數、嗜酸性粒細胞絕對值、淋巴細胞各亞群的比例等參數均有一定的波動醫學教育`網搜集整理。服用某些藥物可能明顯干擾實驗，得出假象結果。因此采血時，應詢問濁否服用過明顯干擾試驗的藥物（如阿司匹林對血小板聚集的抑制作用）關盡可能在一定時間在避免干擾因素條件下進行，以便于比較和動態分析。

　　一、毛細血管采血法

　　成人常用手指或耳垂采血。耳垂采血痛較輕，操作方便，適用于肥復采集，特別是手指皮膚粗厚者，但耳垂外周血循環較差，血細胞容易停滯，受氣溫影響較大，檢查結果不夠恒定。醫學教育`網搜集整理紅細胞、白細胞、血紅蛋白和紅細胞比積結果均比靜脈血高，特別是冬季小波動幅度更大。手指采血操作方便。可獲較多血量。嬰幼兒手指太小可用拇指或足跟采血。嚴重燒傷患者，可選擇皮膚完整處采血，采血器以用帶帶三棱針或專用的“采血針”為好，特別是后者有利于采血技術的質量控制，為了避免交叉應嚴格實行一人一針制。應注意穿刺的深度的適當，切忌用力擠壓，以免混入組織液，影響檢驗結果。

　　二、靜脈采血法

　　幾位于體表的淺靜脈均可作為采血部位，通常采用肘部靜脈，肘部靜脈不明顯時，可用手背靜脈或內踝靜脈。幼兒可于頸外靜脈采血。根據采血量可選用不同型號注射器配血相應的針頭。某些特殊的檢查，比臺血小板的激活，要使用塑料注射器和硅化處理后的試管或塑料閉幕式管。采血前應向病人作適當解釋，以消除不必要的疑慮和恐懼。如遇個別病人采血后發生暈厥，可讓其平臥，通常休息片刻即可恢復。必要時可嗅芳香氨酊，針刺或指掐人中，合谷等穴位。止血帶壓迫時間不難過長，歸好不超過半分鐘，以避免瘀血和血液濃縮，有試驗證明，壓迫時間過長，可引起纖溶活性增強，血小板釋放及甘些因子活性增強，影響某些實驗結果。注射器和容器必須干燥，抽血時避免產生大量泡沫，向血后應先拔針頭，然后將血液徐徐注入標本容器。否則可能導致溶血。溶血標本不僅紅細胞半數，紅細胞比積降低，血漿清化學組成也會產生變化，影響鉀、鎂、轉氨酶等多項指標的測定。有些試驗需用具有嚴密寒緊的，潔凈的橡膠或塑料寒子的玻璃或塑料管作采血及儲存器。目前國外已經普及（國內已開始生產）的封閉式真空采血器，既有利于標本的收集運送和保存，又便于防止血液交叉感染，已開始在國內推廣使用。

　　血液標本的保存條件非常重要，不適當保存直接影響實驗結果。文獻報導，既便將血漿放在4.C冰箱內保存，24小時后的因子活性也僅為采血后即刻實驗結果的5%（減少95%），而供血液分析儀進行細胞計數的血液只能在室溫下保存，低溫保存可使血小板計數結果減低。因此，應根據實驗項止確定最佳的保存條件。

　　三、抗凝劑

　　抗凝劑種類很多，性質各異，必須根據檢驗止的適當選擇，才能獲得預期的結果。現將實驗常用抗凝劑及其使用方法簡述如下：

　　1、乙二胺四乙酸：鹽 EDTA有二鈉、二鉀和三鉀鹽。均可與鈣離子結全成螯合物，從而阻止血液凝固。

　　EDTA鹽經1000C烘干，抗凝作用不變，通常配成15g/L水溶液，每瓶0.4ml，干燥后可抗凝5ml血液。EDTA鹽對紅、白細胞形態影響很小，根據國際血液學標準公委員會1993年文件建議，血細胞計數用EDTA二鉀作抗凝劑，用量為EDTA-K₂.2H₂O1.5-2.2Mg （4.45±0.85μmol）/ml血液。EDTA-NA與EDTA-K₂對血細胞計數影響均較小，但二鈉溶解度明顯低于二鉀，有時影響抗凝效果，其他抗凝劑不適合于血細胞計數。2.枸椽酸鈉：枸椽酸鹽可與血中鈣離子形成可溶性螯合物，從而阻止血液凝固。

　　枸椽酸鈉有多種晶體。通常用前者配成10⁹mmol/l（32g/l）水溶液（也有用10⁶mmol/l濃度），與血液按1：9或1：4比例使用。枸椽鈉對凝血V因子有較好的保護作用，使其活性減低緩，故常用于凝血象的檢查，也用于紅細胞沉降率的測定。因毒性小，是輸積壓保養中的成分之一。

　　由于枸椽酸鈉溶液是按體積肥比例加入血液內達到抗凝目的的，而抗凝劑主要是作用于積壓漿成分，通常所謂的1：9比例抗凝的概念是提1份體積的抗凝劑作用9份紅細胞比積正常血液內的血漿成分而言。所以臺果對貧血或紅細胞增多癥患者的血液仍按1：9的比例加入抗凝劑時，就會發生抗凝劑足或相對過多，這將明顯地影響凝象檢查結果。為了避免這種現象，有文獻報道應根據抗凝劑用量（ml）=0.00185×血量×（100-病人紅細胞比積%）這一公式，來計算抗凝劑的用量。

　　3.草酸鈉：草酸鹽可與血中鈣離子生成草酸鈣沉淀，從而阻止血液凝固。

　　草酸鈉通常用0.1mol/L濃度，與血液按1：9比例使用，過去主要用于凝務象檢查。實踐發現草酸鹽對凝備V因子保護功能差，影響凝血酶原時間測定效果；另外由于草酸鹽與鈣結合形成的是沉淀物，影響自動凝血儀的使用，因此，多數學者認為凝積壓象檢查選用枸椽酸鈉為抗凝劑更為適宜。

　　4.肝素：肝素廣泛在于肺、肝、脾等幾乎所有組織和血管周圍肥大細胞和暑堿性粒細胞的顆粒中。它是一種含硫酸基團的粘多糖，是分散物質，平均分子量為15000（2000-40000）。肝素可加強抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）滅活絲氨酸蛋白酶，從而具有阻止凝血酶形成，對抗凝血酶和阻止血小板聚集等多種作用。每毫升血液抗凝需要持素15±2.5Iu .盡管肝素可以保持紅細胞的自然形態，但由于其常可引起白細胞聚集關使用涂片在羅氏染色時產生藍色背景，因此肝素抗凝血不適全血液學一般檢查。肝素是紅細胞透滲脆性試驗理想的抗凝劑。