四，檢測技術和檢測項目
（一）粘度
粘度測定是血液流變學試驗中最基本，也是最主要的參數。
全血粘度的檢測可使用懸絲法和錐板法兩種測定方法，但是無論那種方法都必須設定高，中，低三個切變率條件，在不同的切變率下測定全血的表觀粘度。國際血液學標準化委員會規定高切變率應當在150s-1，中變率應當在50-60s-1，低變率應當在1-5s-1。
三個切變率的選擇和設定，不僅是測定全血表觀粘度的需要，更重要的是反映紅細胞流變性的需要。我們已經知道，紅細胞的數量對全血粘度影響很大，另外紅細胞的流變性，也就是紅細胞的聚集性和變形性對全血粘度的影響更為明顯，具有極其重要的臨床意義。紅細胞相互聚集越是嚴重，血液粘度越大，血液流動越慢，流速越慢，切變率越小，粘度會進一步增高，血液流動就更慢，紅細胞就更容易聚集，----，如此下去造成惡性循環，進一步加重組織的灌注不良，將帶來一系列嚴重后果；紅細胞本身具有非常大的可塑性，也就是它們非常容易變形，這對于維持血液的流動非常重要。如果紅細胞的變形性減低，那麼血液流動一定減緩，血液粘度就回增加，進一步減低血液的流動速度，切變率變小，粘度增高，-----。如此下去造成惡性循環，進一步加重組織的灌注不良，將帶來一系列嚴重后果。而血液學告訴我們，在低切變率的條件下，紅細胞容易相互聚集（因為內摩擦力小）；而在高切變率條件下，紅細胞容易變形（因為內摩擦力大）。所以，低切變率下測定出的全血表觀粘度實際上反映了該患者紅細胞的聚集性；而高切變率下測定的全血表觀粘度實際上是反映了該患者的紅細胞變形性。
研究表明，低切變率低到1s-1，才能充分體現紅細胞的聚集性，也就是說紅細胞在1s-1低切變率下才能完全聚集。因此，為什麼現在都要求粘度計最好能設定出1s-1的低切變率條件。
血漿粘度測定相對簡便，因為它不需要設定不同的切變率條件，一般規定在高切變率下（100 s-1-120 s-1范圍測定即可。但是，錐板法粘度計由于在高切變率在測定時產生二次湍流現象，無法準確測定血漿粘度，所以不主張使用錐板法測定血漿粘度，可采用毛細管法或懸絲法。
懸絲粘度計有進口和國產品，其技術關鍵在于懸絲的設計和制造。到目前為止，只有懸絲法的儀器才可能將低切變率做到1S-1，所以是目前精度最高的儀器。下面對懸絲粘度計做簡單介紹。
懸絲粘度計屬于無磨擦粘度計，它由內外兩個圓筒組成，外筒由馬達帶動旋轉，轉動力距通過血樣傳遞得內筒，內筒本身不轉動。檢測時，內外筒之間僅通過樣品接觸，沒有附加摩擦力距。內筒是懸掛在一根彈性另好而敏感的懸絲上，懸絲與內筒之間有一個多極電磁鐵的鐵芯和一面反光鏡。當內筒受到由血樣傳入的力時，內筒隨外筒轉動也有所轉動，反光鏡也會發生轉動，使電磁鐵也產生一個與內筒的力距大小相等而方向相反的反饋力距，平衡血樣經內筒的力距使內筒恢復到原來的位置。儀器通過測量流過電磁鐵的電流計算出血樣的粘度。其突出優點是測試探頭為雙縫隙結構，末端效應小，無二次湍流，最適合檢測低切變率下的粘度。經使用單位評價，用國家計量標準油（一個是低粘度8.77mPa.s，另一個是高粘度18.70mPa.s）測試儀器，所有偏差為0.5-1.5%，準確度符合要求；使用紅細胞比積為0.44的樣品，用自身血漿調整比積0.01的改變，從0.43-0.49，高，中，低三個切變率下的檢測結果均有差異，說明該儀器的分辨率達到要求；重復性檢測，180 s-1時的CV值為1.7%，1 s-1時的CV值為3.0%，也到達了國際血液標準化委員會（ICSH）提出的要求。《以上數據引自：揚 萍，李 巍，李 旭：BV-100懸絲流變儀性能檢測分析，中國血液流變學雜志，2001；11（2）：171-172》
切變率是由外筒的轉速決定的，見表
表 BV-100轉速與切變率的關系
---------------------------------------------------------
轉速（轉/分） 切變率（s-1）
----------------------------------------------------------
90 180
15 30
0.5 1
---------------------------------------------------------
（二）紅細胞流變性
1，紅細胞聚集性
我們可以通過以下方法測定或計算紅細胞的聚集性。
（1）低切變率，最好是1s-1條件下全血粘度。
（2）根據粘度計算出所謂的紅細胞聚集指數。
（3）血沉（ESR）和血沉方程K值
紅細胞越是相互聚集，血沉速度就越快。但是血沉速度快慢還受紅細胞數量的明顯影響，為了排除紅細胞數量（紅細胞比積）的影響，人們設計了一個公式，采用了一個新的參數，即血沉方程K值來表示紅細胞的聚集性。
血沉測定值
血沉K值 = -------------------------------------- en 是自然對數
-（血漿比積+en紅細胞比積）
這樣，血沉K值越大，表明紅細胞聚集性越強。
（4）紅細胞電泳率
紅細胞表面帶有負電荷使它們之間有種排斥力而彼此不相互聚集，在電場中可向正極移動。利用這一特征，設計了紅細胞電泳儀，可以在顯微鏡下觀察和計算紅細胞泳動的速度，見下面計算公式： 紅細胞泳動的距離（mm）
紅細胞電泳速度（U）= -----------------------------------------
計數20個紅細胞通過的平均時間（s）
如果紅細胞聚集在一起，其泳動的速度就會減慢。根據這一觀察可以了解患者紅細胞的聚集性。
根據以上結果還可以計算紅細胞的電泳率，見下面公式：
紅細胞電泳速度（U）
紅細胞電泳率（V）（EPM）= -----------------------------
電場強度（E，V/cm）
（5）有的粘度計可以通過數學公式，從粘度上推導出所謂紅細胞電泳指數。
2，紅細胞變形性
我們可以通過以下方法測定或計算紅細胞變形性。
（1）高切變率，一般是1501s-1條件下全血粘度。
（2）根據粘度計算出所謂紅細胞變形指數和剛性指數。
（3）紅細胞濾過指數
這是目前應用最廣的，也是比較直接的測定紅細胞變形性的方法。它是將一定濃度的紅細胞懸液（10%），通過一個由負壓抽取的微孔濾膜，根據紅細胞懸液通過的時間計算出紅細胞的濾過指數，見下公式。
參照介質通過時間 1
紅細胞濾過指數（IF）= ---------------------------- -------
紅細胞懸液通過時間 Hct
（4）激光衍射法
將紅細胞懸液在高切變率作用下使之變形再通過激光的照射，然后將單個紅細胞的影象記錄在膠卷底片上，不僅可以直接觀察紅細胞的形態變化，而且可通過計算紅細胞體積的長徑和橫徑直接反映紅細胞的變形情況。
五、影響血液流變學檢測指標結果的因素
（一）影響全血粘度的因素
1、紅細胞比積
紅細胞占血細胞的95%以上，白細胞只占1/600，血小板只占1/800。所以，紅細胞數量與全血粘度成正相關性。
2、紅細胞變形性
在適當的切變率下，即使紅細胞比積達到95-99%，血液仍能保持流動。而與紅細胞大小相同的剛性顆粒懸浮液，當其濃度僅為65%時，就成為混凝土般的稠度，不能流動。這是由于紅細胞是一種內粘度很低，具有很大流動性的物質。當紅細胞變形性降低，血液粘度增加。
3、紅細胞聚集性
紅細胞聚集性是指紅細胞之間形成紅細胞聚集體的能力。當紅細胞聚集后，血液流動減慢，粘度增高，阻力增加，容易堵塞小血管。
4、血漿粘度
血漿粘度主要有血漿中大分子物質決定，包括各種蛋白質和脂類，其中一血漿纖維蛋白原影響最大。這主要由于纖維蛋白原可形成鏈狀分子結構，使紅細胞相互聚集，形成緡錢狀。
5、溫度效應
溫度對血液粘度的影響較為復雜。一般講，血漿粘度隨溫度增高而減低；而對全血粘度來講，溫度從37°C升高到40°C，紅細胞聚集增強，變形性減低，粘度增高。
6、其他
切應力，切變時間，血液pH值，滲透壓，白細胞及血小板數量和功能，凝血系統，抗凝及纖容系統也都對血液粘度有不同程度的影響。
（二）血漿粘度
1、血漿中大分子物質，如纖維蛋白原，球蛋白和脂類，血漿粘度隨它們的含量增加而增高。
2、溫度，血漿粘度隨溫度增高而降低。
3、血容量，血漿粘度隨血容量減少而增高；反之降低。
（三）影響紅細胞聚集性的因素
1、高分子的橋連力
血漿中纖維蛋白原和球蛋白分子能夠將相鄰的兩個紅細胞連接起來，形成疊連體。
2、表面曲力
即紅細胞的幾何形狀和變形性，由于正常紅細胞為雙凹園盤狀，相互之間接觸面積較大，所有紅細胞容易形成疊連體。當紅細胞成球型或變形性減低（剛性增強）時，紅細胞聚集能力減低。
3、靜電排斥力
紅細胞表面的唾液酸使紅細胞表面帶負電荷，彼此相互排斥。當病毒感染或其他原因造成紅細胞表面電荷減少，細胞容易聚集。
4、切應力或切變率
切應力是紅細胞表面所受的外力，在不同管徑的血管中，由于血流造成的切應力不同。在一定范圍里，管徑越小，切應力約大。動脈內切應力大于靜脈中的切應力，所以，在靜脈中紅細胞容易聚集。
（四）影響紅細胞變形性的因素
1、紅細胞變形性的定義和生理作用
（1） 定義：
紅細胞變形性（red cell deformability，RCD）或稱紅細胞的柔順性（flexibility）或流動性（fluidity），可簡單地定義為正常紅細胞具有能通過比自身直徑小的毛細血管的能力。
（2） 生理作用：
A 調節血液粘度
在血流較快，切變率較高（>100s-1）時，如在大動脈中，紅細胞不聚集，呈分散狀態，紅細胞形態為圓形雙凹狀。這時，即使紅細胞數量很多，例如比積大于93%，仍可以保證血液流動，這是變形造成的粘度下降所致。如果，是不能變形的顆粒，比積在60%時，就成為固態。
B 保障微循環
在直徑小于自身的微血管中，隨著血流加速，切變率增加，紅細胞可以變成帽狀，拖鞋狀或香腸狀，并沿長軸方面與血流一致。這種形態上的變化，可降低血流阻力，有利于血液流動，保障微循環的通常。
（2）影響紅細胞變形性的因素
A 紅細胞膜的化學成分
細胞膜中的脂類有兩個極性端，一端為親水端，另一端為疏水端。疏水端有的有兩條長碳鏈組成，有的僅一條。凡結構中有兩條長碳鏈的，膜的可變形性高。此外，細胞膜中膽固醇的含量高，紅細胞的變形性差，反之，變形性好。
B 血漿中的滲透壓
無論是膠體滲透壓，還是晶體滲透壓，其變化均引起紅細胞內水分的變化。無論是細胞體積膨脹，還是體積收縮，都會改變紅細胞的形狀，從而導致細胞膜的粘彈性改變。
C 紅細胞內粘度
一個正常的紅細胞內含血紅蛋白32pg，內粘度為6 mPa.s。當紅細胞內血紅蛋白，特別是異常血紅蛋白增加時，內粘度增加，細胞的變形性減低。
D 氧張力
血氧含量及其張力下降后，紅細胞內氧合血紅蛋白成為脫氧血紅蛋白，細胞的剛性明顯增加，變形性下降。
E 紅細胞內ATP
ATP含量下降，紅細胞失去正常雙凹園形，變形性降低。此外，ATP的減少還影響細胞膜上的鈉-鉀及鈣離子通道，影響細胞形態。
六，血液流變學參數在臨床應用中的具體使用
1 病人與健康人的比較，幫助分析發病機制上的原因，提供診斷手段；
2 做為中，老年人健康體檢的指標，預測心腦血管病發生的可能性；
3 觀察治療過程中各種參數的變化規律，分析治療原理和效果：
（1）抗凝治療和溶栓治療，
（2）稀釋療法和減粘治療，
（3）光量子，激光以及光電理療，
（4）體外洗血療法。
4 篩選藥物。