自動化血液細胞分析儀由于操作簡便、快速、結果準確及精密度高,少量血液就可完成多項參數的分析,大大促進了血液學檢驗技術的發展并為臨床醫學提供了更多的診斷信息,但在血細胞計數時受到諸多因素(如試劑、溫度、pH、抗凝藥物、電壓、電流、磁場及振源等)的影響。為避免這些因素對檢驗結果準確性的影響,提高結果的可靠性,現將工作中遇到的問題分析報道如下。
1 標本采集及抗凝劑的使用
標本采集及抗凝劑的使用是血細胞分析儀使用前的質量控制關鍵問題,十分重要,但是人們往往不重視。血液標本采集與抗凝劑對血細胞分析結果的準確性影響非常大,例如采血不順利或抗凝效果差常導致血小板計數減少;同時,采血不順利、血標本中存在肉眼不易發現的小凝塊可導致血細胞分析儀的計數孔不完全或完全堵塞。計數孔不完全堵塞,不容易發現,易造成血標本檢測結果的誤差。血細胞分析最適抗凝劑為EDTA鹽,它對血細胞形態和血小板計數影響很小,國際血液與標準儀委員會(ICSH)1993年文件建議,血細胞分析用EDTA-K2作抗凝劑,用量為1.5―2.2 mg/mL血液。同時應注意EDTA依賴性血小板聚集可導致假性血小板減少,主要見于腫瘤、自身免疫病、肺心病、晚期妊娠、肝病、毒血癥及一些不明原因疾病,遇到上述情況,應該使用草酸銨稀釋液等方法計數血小板。
2 影響白細胞分析的因素
正常情況下,血液分析儀白細胞分類按細胞大小依次分為淋巴細胞、中值細胞、中性粒細胞,圖形有一定的分布規律,但在操作時經常遇到干擾現象:(1)膽紅素增高時的干擾:白細胞分類時淋巴細胞增高,中性粒細胞減少,白細胞圖形是干擾圖形,RM(多區域干擾)提示白細胞直方圖35fL前區出現狹窄而較高的峰,中性粒細胞區域圖形呈一條直線;分類淋巴細胞偏高.中性粒細胞降低。與手工分類完全相反。白細胞分類時中性粒細胞區域呈一條直線圖形,結果不可信,必須做鏡檢,但小兒例外。(2) 移動信號的干擾:有時儀器受其他干擾(電磁干擾、堵孔等)也可出現RM的提示,白細胞直方圖35 fL前區出現狹窄尖峰,經查詢附近有一移動信號放大器,撤除后儀器恢復正常。 (3)異常球蛋白增高,如漿細胞疾病、白血病、自身免疫性疾病、感染及某些原因不明疾病等異常球蛋白增高,白細胞直方圖在35fL區域呈干擾圖形。(4)在慢粒急變期白細胞總數太多,儀器無法計數。白細胞圖形呈長方形板塊,不能分類。此時應將標本稀釋后再做,結果乘以稀釋倍數。
3 紅細胞計數干擾
正常情況下在75 fL―l00 fL處形成一高峰。(1)某些患者有寒冷凝集素。紅細胞常不計數,顯示“> >>”,可將標本放37℃水浴15 min后再做,即可計數。工作中遇到這樣的情況也很多。(2)高球蛋白血癥,如漿細胞疾病、白血病、自身免疫性疾病、嚴重感染及某些原因不明的血液中異常球蛋白增高圍繞紅細胞等。使紅細胞有聚集現象,紅細胞計數減少,紅細胞平均體積(MCV)增大,造成紅細胞平均血紅蛋白量(MCH)和紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)等指標錯誤結果,將標本稀釋或預稀釋即可。(3)白細胞顯著增高,在正常情況下,由于白細胞比紅細胞數少得多,不會對紅細胞計數造成影響,但在白血病時,白細胞數目可顯著增多。從而影響紅細胞計數的準確性,此時應將紅細胞值修正后才可出報告單。
4血小板干擾因素
正常情況下20 fi―35 fi之間有一個集中的峰逐漸向下。 (1) 血小板聚集分為可逆聚集和不可逆聚集[1],有少數患者抽血后測定血小板數目偏低,放半小時后再測定則數目正常,原因可能是放置一定時間后血小板可逆聚集。(2)小紅細胞。在缺鐵性貧血患者,紅細胞大小不均,以小紅細胞居多,部分極小紅細胞計人血小板,在15 fL―30 fL處形成峰區,此時結果不精確。(3)大血小板 由于大部分血液分析儀不能將大血小板與小紅細胞等分開,致使許多大血小板被當成紅細胞而未計入血小板總數中,從而使血小板計數結果偏低[2]。
5 討論
血細胞分析儀易受多種因素干擾,必須對每份標本的結果仔細觀察.認真核對.觀察圖形是否正常。正確了解并分析直方圖形在實際工作中尤為重要 ,HGB與RBC比例是否與診斷相符。必要時做涂片鏡檢。
綜上所述,血細胞分析儀使用中應該注意上述的問題,使臨床應用最多的血細胞分析(CBC,即血常規)的每一個數據都成為有價值的檢驗指標。