血清學檢測方法,在醫學及生物學研究中起著重要的作用,并被廣泛應用。其基本原理,就是利用抗原(antigen)抗體(antibody)特異反應來實現的。抗原,分成完整抗原和半抗原,完整抗原是一種具有生物學活性物質或化合物,當它被注射到動物中時能誘導產生特異抗體,抗原和它誘導產生的特異抗體能產生免疫反應;而半抗原,本身不能誘導動物產生特異抗體(除非被交聯到某些載體上),但能和抗體產生反應。生物體內許多成分都是很好的抗原,如蛋白質、多糖、脂類等。核酸雖然也能作為抗原,但不能誘導產生區分核酸序列的抗體,沒有多少實際應用價值。一種抗原可能具有誘導產生多個抗體的空間機構,即具有多個抗原決定族,每個抗原決定族能誘導產生一種抗體,因此動物血液中往往同時存在許多種抗體,每種抗體由一種細胞產生,從血液中直接分離得到的抗體,叫做多克隆抗體。
一個產生抗體的細胞擴大培養,再分離得到的抗體叫做單克隆抗體。抗原抗體反應是一種非共價鍵特異性吸附反應,即通常情況下,抗原只和它自己(或者具有相同抗原決定族的抗原)誘導產生的抗體發生反應,因此血清學反應具有高度的專一性。
抗原抗體反應,雖然能產生肉眼能見到的凝聚反應,可用于檢測,但此法靈敏度不夠而且需要大量的抗原抗體,現在很少應用。在實際工作中應用最多的現在有兩種方法,一種叫做酶聯免疫法(ELISA),此法則通過酶反應將抗原抗體反應信號放大,從而提高了檢測靈敏度,而且還能通過產生有顏色的底物用儀器或肉眼識別,此法一般在酶聯板上或膜上進行,進行一次檢測需要4h左右;另一種叫做試紙條法,此法主要將特異的抗體交聯到試紙條上和有顏色的物質上,當紙上抗體和特異抗原結合后,再和帶有顏色的特異抗體進行反應時,就形成了帶有顏色的三明治機構,并且固在試紙條上,如果沒有抗原,則沒有顏色。血清學檢測快速、具有一定的靈敏度也能進行半定量,尤其是試紙條法,不需要特殊的儀器設備,在現場檢驗或初篩中具有較好的應用前景。