(1)澆瓊脂板時注意避免產生氣泡。
(2)稀釋血清、抗血清所使用的吸量管必須固定。稀釋參考血清和患者血清皆用統一校正過的吸管，否則要用同一根吸管。其他器材也最好統一。
(3)所用瓊脂濃度一定要嚴格控制，分裝后防止干燥，不要反復溶解。溶解時不要煮沸時間過長，以防水份蒸發。56℃溫度要嚴格，太熱會破壞血清，太冷易凝固。混合要迅速、充分。
(4)加好血清后放的位置一定要保持水平，以防擴散圈變形。
(5)受檢者血清須新鮮。如條件不許可，可將血清冰凍保存或稀釋后保存，數天之內影響不大，時間久后易使C3值增高。