1. 按分離小鼠心臟內皮細胞的步驟操作。
2. 在步驟 7 用 Ⅱ 型膠原蛋白酶(1 mg/ml)消化組織。
3. 按照方案23.28C 的步驟 20,用包被人 MHC-Ⅱ 類抗原或 CD31 抗體的磁珠分選內皮細胞。然后,從方案23. 28C 的步驟 23 繼續操作。
4. 用 HCEC 生長培養液(含有 4 mmol/L L-谷氨酰胺的 M199,添加 10 % FBS、10 % 人男性 AB 血清(Sigma)、150 U/ml 青霉素、150 μg/ml 鏈霉素和 ECGS )維持培養 HCEC 。 |