實驗原理
血液中所含的葡萄糖，稱為血糖。它是糖在體內的運輸形式。目前國內醫院多采用葡萄糖氧化酶法和鄰甲苯胺法測定血糖。前者特異性強、價廉、方法簡單,其正常值：空腹全血為3.6～5.3毫摩爾/升（65～95毫克/分升），血漿為
3.9～6.1毫摩爾/升。后者由于血中絕大部分非糖物質及抗凝劑中的氧化物同時被沉淀下來，因而不易出現假性過高或過低, 結果較可靠,
其正常值：空腹全血為3.3～5.6毫摩爾/升（60～100毫克/分升），血漿為3.9～6.4毫摩爾/升（70～115毫克/分升）。本實驗采用鄰甲苯胺法測定血糖。其原理是葡萄糖在酸性介質中加熱脫水反應生成5－羥甲基－2－呋喃甲醛，分子中的醛基與鄰甲苯胺縮合成青色的薛夫氏堿，通過比色可以定量。
試劑和器材
一、試劑
鄰甲苯胺試劑：:稱取硫脲1.5ｇ溶于750ｍL冰醋酸中, 加鄰甲苯胺150ｍL及飽和硼酸40ｍL, 混勻后加冰醋酸至1000ｍL, 置棕色瓶中，冰箱保存。
葡萄糖標準溶液：5.0mg/mL，臨用時稀釋成1.0 mg/mL。
二、材料
人血清。
三、器材
具塞試管1.5×15cm（×8）；分光光度計。
操作方法
一、制作標準曲線
取6支試管編號后，按下表順序加入試劑：
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管號 |
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
標準葡萄糖液(mL) |
0.00 |
0.02 |
0.04 |
0.06 |
0.08 |
0.10 |
|
蒸餾水(mL) |
0.10 |
0.08 |
0.06 |
0.04 |
0.02 |
0.00 |
|
鄰甲苯胺試劑(mL) |
5.0 |
5.0 |
5.0 |
5.0 |
5.0 |
5.0 |
|
A630 |
加畢，溫和混勻，于沸水浴中煮沸4min取下，冷卻，放置30min，用1cm比色杯，試劑空白為參比，測定 630nm 處吸光值，繪制標準曲線。
二、樣品測定
取3支試管編號后，分別加入試劑，與標準曲線同時作比色測定：
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管號 |
對照 |
樣品 ① |
樣品② |
|
稀釋的未知血清樣品(mL) |
0 |
0.10 |
0.10 |
|
蒸餾水(mL) |
0.10 |
0.00 |
0.00 |
|
鄰甲苯胺試劑(mL) |
5.0 |
5.0 |
5.0 |
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A630 |
加畢，溫和混勻，于沸水浴中煮沸4min取下，冷卻，放置30min，用 1cm比色杯，試劑空白為參比，測定630nm 處吸光值，從標準曲線中可查出樣品中血糖含量。
注意事項
鄰苯甲胺法測定血糖具有操作簡單,特異性較高的優點, 試劑成本也較低, 目前在教學實驗或規模較小的基層醫院用于測定血糖。但該法一般在濃酸高溫條件下發生反應, 因此在做血糖測定時須多加注意。