【摘要】 目的 比較全自動血細胞分析儀及下白細胞分類,來論證血細胞分析儀分類白細胞與人工分類的統計學差異。 方法 用全自動血細胞分析儀、人工血涂片進行瑞氏染色用顯微鏡油鏡對白細胞分類,對其計數結果進行統計學分析。 結果 通過56例病住院患者檢驗報告分析表明,其中6例不能識別細胞的類型,由人工分類發現各階段幼稚細胞,另外50例經全自動血細胞分析儀和人工同時檢出的結果進行統計學分析:除淋巴細胞無差異外,其余差異均有顯著性(P<0.05)及差異有非常顯著性(P<0.01)。 結論 全自動血細胞分析儀雖對白細胞分類具有較好的準確性及快捷性,但只能作為一種過篩手段進行初檢,還不能完全替代人工顯微鏡分類方法,尤其是血液病患者除進行儀器分類外還應進行人工分類,以便更好的指導臨床治療。
【關鍵詞】 白細胞分類;全自動血細胞分析儀;人工分類
全自動血細胞分析儀采用半導體激光流式細胞技術、分子生物學水平的熒光核酸染色對白細胞進行測定分析。但干擾因素多,而產生一定的誤差,因此還需與人工顯微鏡分類相結合,方能更好指導臨床治療。
1 材料
1.1 檢測對象 住院患者56例,男40例,女16例。年齡14~66歲。其中急性髓細胞白血病27例,急性淋巴細胞白血病10例,慢性粒細胞白血病4例,再障6例,多發性骨髓瘤2例,血小板減少性紫癜1例,陣發性血紅蛋白尿1例,診斷待查5例。
1.2 儀器 Sysmex XE-2100全自動血細胞分析儀,奧林巴斯顯微鏡。
1.3 試劑 日本西森美康電子株式會社生產的配套試劑。1.4 染料 瑞氏染料。 2 方法
2.1 采血 0.5ml塑料離心管內加入10μl EDTA-K 2 [LB1]抗凝劑,取0.2ml末梢血混勻,動作應輕,以免溶血。同時取一滴血于干凈玻片上,制備一張薄厚適宜、細胞分布均勻的血片。
2.2 計數及分類 專人上機操作,嚴格按照全自動血細胞分析儀(以下稱為儀器分類)的操作程序進行。測定前用物校正儀器。專人對血片進行瑞氏染色并用顯微鏡油鏡(以下稱為人工分類)根據各類白細胞形態特點進行細胞分類,計數100個白細胞得出相對比值(%),并有高年資人員進行核實以減少誤差。
2.3 統計學方法 百分比屬于泊松分布,為了進行統計分析,將百分比數據進行平方根反正弦變換(數據轉換公式為A=sin- 1 P 1/2 ),即將百分比轉換成弧度后,進行配對數據t檢驗;最后的統計結果再將弧度轉換成百分比。
3 結果
3.1 兩種方法檢測比較 56例檢測對象中50例儀器和人工同時檢出的占89.3%,其中6例儀器未檢出,經人工分類發現各階段幼稚細胞的占10.7%。
3.2 檢測白細胞分類比較 50例儀器和人工同時檢出的結果進行統計學分析見表1。
表1 儀器和手工檢測白細胞分類的比較(略)
注:每組檢測50例患者(n=50)
說明:采用儀器分類和人工分類方法,中性粒細胞、單核細胞差異有顯著性(P<0.05),嗜酸粒細胞、嗜堿粒細胞差異有非常顯著性(P<0.01),淋巴細胞差異無顯著性(P>0.05)。
4 討論
由于全自動血細胞分析儀是采用半導體激光流式細胞技術,分子生物學水平的熒光核酸染色對白細胞進行測定分析的,不是由細胞膜結構的差異來鑒別細胞,因此干擾因素較多,易產生一定的誤差。儀器分類雖然能較好的反映正常白細胞的確切類別,其分類具有較好的準確性及快捷性,但應注意在儀器對白細胞進行分析時,不能識別異型淋巴、中性粒細胞毒性病變等。更由于血液病人的特殊情況及臨床上各種化療藥物對細胞形態的影響,特別是白血病時的異常血細胞,由于數量分布波動大,形態變化等原因,儀器檢測不能準確反映實際分布情況。以及血液標本中的顆粒、等,都是使儀器分類造成誤差的因素。
人工分類可以通過顯微鏡根據各類細胞的細胞核、細胞漿、顆粒、核染色質等特征對其進行分析,可以較準確分辨各階段的幼稚細胞(幼單、幼淋、幼粒)及有核紅細胞。還可以發現白細胞的異常變化如中性粒細胞核左移、空泡、中毒顆粒及異型淋巴細胞等。
因此,全自動血細胞分析儀分類方法只能作為一種過篩手段進行初檢,還不能完全替代人工顯微鏡分類方法,特別是對于血液病患者,當儀器分類結果有異常提示時,一定要做人工顯微鏡分類核實。此外,日常質控工作要做好,以保持儀器準確、可靠。并且要提高工作人員對外周血異常細胞的識別水平,更好地為臨床服務。
作者單位:300020天津,中國醫學科學院、中國協和醫科大學血液病醫院檢測中心