血細胞分析儀的校準和質控

【摘要】 目的  探討用新鮮血代替校準物對血液細胞分析儀進行校準。 方法  以Abbott CD-3200為校準參考儀器，用新鮮血液作為校準品，校準本室Abbott CD-1700（1）、CD-1700（2）和Act.diff（Beckman Coulter）三臺血細胞分析儀。 結果  三臺血細胞分析儀與校準參考儀器的各檢測指標相關系數（r）均>0.90;新鮮全血的質控偏差結果顯示:RDW的最大CV值為2.8%，PLT的最大CV值為4.9%，MPV的最大CV值為14.6%，余各項指標的CV值均<2.0%。 結論  新鮮血可作為校準物;每天對同一實驗室不同血細胞分析儀結果進行校準，是保證分析結果的準確度和精密度的有效手段和措施。

　　關鍵詞  血液 血細胞計數 質量控制

　　在血液細胞分析儀質量控制過程中，儀器的校正是必不可少的，新儀器安裝或每次維修后都應進行儀器的校正。儀器校正液是權威部門認可的標準物質，但只能用于校正同型號的儀器，不能用于其他品牌儀器的校正。血細胞分析的檢測結果只有直接或間接地溯源至參考方法，才能保證結果的準確性和不同實驗室檢測結果的可比性 ［1］ ，最好的校正液是經ICSH推薦參考方法定值的新鮮人體血液。（1）氰化高鐵血紅蛋白法測定血紅蛋白（HGB）;（2）微量紅細胞壓積法測定紅細胞比容（HCT）;（3）微量計數板手工計數RBC和WBC;（4）相差顯微鏡計數血小板。所有器材都要經過嚴格校正;該校正液能適合于各種型號的儀器校準之用。但由于血細胞分析檢測系統配套校準物的價格高、進口入關手續的辦理較難、效期短且難以及時獲得等特點，使校準物的使用難以得到推廣。此外，一些血細胞分析檢測系統無配套的校準物，致使用戶無法進行校準。在缺乏理想的多通道血細胞分析儀的質量控制系統的情況下，使用了不同的質量控制品，包括新鮮全血、穩定血液樣品、非生物代用品等。血細胞分析是臨床最常用的實驗室檢測指標，其結果的準確性直接影響對患者的診斷和治療。為了對本室不同的血細胞分析儀測定結果的準確性及可靠性進行分析，我們用物理和化學成分與患者相同EDTA-K 2 抗凝的新鮮全血，代替校準物對血液細胞分析儀進行校準，探討新的校準品。

　　1 材料與方法

　　1.1 材料

    1.1.1 儀器與試劑 Abbott CD-3200血細胞分析儀及進口配套試劑;Abbott CD-1700血細胞分析儀及進口配套試劑;Act.diff（Beckman Coulter）血細胞分析儀及進口配套試劑。

    1.1.2 校準物 Abbott CD-3200原裝進口配套CELL- DYN系列質控品及校準物，批號R0114A。

    1.1.3 標本采集 臨床患者新鮮靜脈抗凝血2ml（EDTA-K 2 抗凝管）。

    1.2 方法 用Abbott CD-3200原裝進口配套CELL-DYN系列質控品及校準品對該儀器進行本底測試和高、中、低值質控重復測定5次;校準完成后，把用作標準的新鮮血連續測定10次，計算均值，并把此均值作為新鮮血的參考值;用新鮮血代替校準品對本室Abbott CD-1700（1）、CD-1700（2）和Act.diff（Beckman Coulter）三臺血細胞分析儀進行校準;然后隨機選取一個正常新鮮血抗凝全標本對四臺血細胞分析儀進行質控，與患者標本一起測定;以Abbott CD-3200血細胞分析儀測定的5份新鮮血標本為參考，分別在其他三臺分析儀上測定5次，取其均值，計算它們與被校準儀的偏差。

　　1.3 統計學方法 采用電腦程序化的樣本配對t檢驗和線性回歸統計學方法進行分析。

2 結果

　　用新鮮血代替校準品對本室Abbott CD-1700（1）、CD-1700（2）和Act.diff（Beckman Coulter）三臺血細胞分析儀進行校準;隨機選取一個正常新鮮血抗凝全標本對四臺血細胞分析儀與患者標本一起測定，三臺血細胞分析儀與Ab-bott CD-3200各參數之間的相關系數r>0.9。特別是WBC、RBC、HGB、HCT這四項參數的符合性最好，見表1。 以Abbott CD-3200血細胞分析儀測定的5份新鮮血標本為參考分別在其他三臺分析儀上測定5次，計算它們與被校準儀器的偏差，結果表明:用配套校準品校準過Ab-bott CD-3200血液細胞分析儀與用新鮮血校準過的三臺儀器測定5份新鮮血的結果非常接近，只有PLT和MPV的偏差比較大，但仍在可接受范圍內，見表2。

　　表1 被校準三臺血細胞分析儀相關性分析 （略）

　　表2 三臺血細胞新鮮血測定結果與CD-3200測定值的偏差 （略）

　　3 討論

　　血細胞分析儀由于計數結果準確，精密度高，操作簡便、快速，因而發展迅速，已逐漸取代傳統的手工法，并成為臨床實驗室的主要檢測手段。由于生產血細胞儀的廠家較多，各自使用的測定原理和方法不盡相同，導致其測定結果及參考范圍有所差異。另一方面，在國內的大中型醫院，同一實驗室使用不同廠家和型號的血細胞計數儀已成為較普遍現象，致使在同一實驗室內同一標本用不同的儀器分析，出現測定值的差異，給評估和解釋結果帶來一定的困難，給疾病的診斷、治療及預后帶來誤解和不良的影響 ［2］ 。在血液細胞分析儀質量控制過程中，儀器的校準是不可少的。所謂自動血液細胞分析儀實際上就是一臺比較器，將它實測數據與校準數據進行比較，從而得出血標本的測定結果。由此可見，標準物在儀器測定結果是否準確的問題上有決定性的作用 ［3］ 。為保證血液細胞分析儀準確性，最好使用儀器生產廠家推薦的配套校準物對儀器進行校準，但由于校準物價格昂貴且有效期特別短，可只購買一臺性能較好儀器的配套校準物 ［4］ 。 血細胞分析儀是精密測量儀器，對周圍環境有較高的要求。溫度、相對濕度、周圍電磁場及室內空氣中塵埃，都會干擾儀器進行血細胞計數時的電脈沖分析，特別是對血小板計數的干擾更為突出，是導致PLT、MPV偏差較大的原 因之一;我室由于情況特殊，除Abbott CD-3200血細胞分析儀在周圍環境較好的住院部專門儀器房外，余三臺血細胞分析儀均集中在條件較差的門診。而且在EDTA―K 2 抗凝血中，血小板體積不穩定，隨時間的延長而增大，這也是導致PLT、MPV偏差較大的主要原因。本研究結果表明:用新鮮血校準的三臺血細胞分析儀與Abbott CD-3200各參數之間的相關系數r>0.90，特別是WBC、RBC、HGB、HCT這四項參數的符合性最好;說明用新鮮血校準血液細胞分析儀可取得滿意結果。每天對同一實驗室不同血細胞分析儀結果進行校準，是保證分析結果準確度和精密度的有效手段和措施。用配套校準物校準一臺性能最佳的血細胞分析儀，再用新鮮血在這臺儀器上得出參考值后去校準其他儀器，既可節省經費，又能保證實驗結果的可靠性。

　　參考文獻

　　1 彭明婷，申子瑜.血細胞分析溯源體系的建立及有關問題的探討.中華檢驗醫學雜志，2004，27（3）:132-133.

    2 彭明婷，谷小林.不同方法校準血液分析儀結果比較.中華檢驗 醫學雜志，2000，23（1）:35-37.

    3 顧可梁，陳軍浩，谷俊俠.醫學實驗診斷學進展.南京:東南大學出版社，2000，47-53.

    4 戴雋.新鮮血在校準血液細胞分析儀的應用.江西醫學檢驗，2003，21（3）:205-206.