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  • 發布時間:2019-05-05 17:42 原文鏈接: 血脂檢測試劑對總膽汁酸測定的交叉污染

     全自動生化分析儀具有微量、快速、多項、準確、重復性好等特點。隨著全自動生化分析儀的廣泛應用,其測定過程中存在的交叉污染問題也受到關注。分析儀使用同一根試劑針吸取試劑,雖然分析儀有清洗系統,但試劑針很難通過一次短暫快速的清洗程序就清洗干凈,一個項目對隨后的一個項目甚至幾個項目都會帶來一定程度的試劑污染[1],并且隨著儀器使用時間的增加,試劑交叉污染程度會有所加劇。在工作中我們發現測定血脂后測定的總膽汁酸(tba),再復查時與原來測定值有差異,為研究血脂試劑是否都影響tba測定,我們實驗觀察了tc,tg,hdl,ldl等試劑,對tba是否存在交叉污染的情況進行分析,報告如下。

      1  材料與方法

      1.1  儀器與試劑  olympus au640全自動生化分析儀由日本olympus公司提供,tc,tg,hdl,ldl試劑由日本協和試劑提供,tba由日本第一化學試劑提供。

      1.2  測定方法

      1)首先對儀器進行保養,對比色杯、攪拌棒、試劑針進行浸泡清洗,以排除儀器本身原因對結果的影響。

      2)從當天送檢標本中提取血清,制備混合血清,取10份血清連續分別檢測tba,此組數據設為tba。

      3)再取50份血清,從1號到50號排序,1號檢測tc,2,3,4,5號檢測tba;6號檢測tc,7,8,9,10號檢測tba;11號檢測tc,12,13,14,15號檢測tba;16號檢測tc,17,18,19,20號檢測tba;以此類推,檢測到50號。將2,6,12,16,22,26,32,36,42,46數據設為tc s1,將3,7,13,17,23,27,33,37,43,47數據設為tc s2,以此類推,得出數據tc s3,tc s4。

      4)以同樣的方法得出數據tg s1~s4,hdl s1~s4,ldl s1~s4。

      1.3  統計學方法  采用spss軟件,進行配對t檢驗。

      2  結果

      1)tba與測定血脂后tba測定值比較見表1。

      表1  tba與測定血脂后tba測定值比較(略)

      tba數據分別與s1,s2,s3,s4進行比較,結果見表2。在tc,hdl組,tba與s1,s2,s3比較差異有統計學意義(p<0.05),與s4比較差異無統計學意義(p>0.05)。在tg,ldl組,tba與s1比較差異有統計學意義(p<0.05),與s2,s3,s4比較差異無統計學意義(p>0.05)。
      2)分別取tc,tg,hdl,ldl試劑2各10份,作為標本檢測tba,結果見表3。

      表2  tba分別與s1,s2,s3,s4配對t檢驗p值表(略)

      表3  血脂試劑2中tba含量(略)

      3  討論

      olympus au640全自動生化分析儀的試劑針要接觸試劑盤中的各種試劑,每種不同項目間的吸取僅有一次沖洗過程,如果存在試劑交叉污染,將會對分析結果造成很大影響。由表2中可以看出血脂試劑對tba檢測存在嚴重的交叉污染(p<0.05)。tc,hdl試劑可以影響tba三個測試,tg,ldl試劑可以影響tba一個測試。試劑間的交叉污染原因是多方面的,主要有三個:第一,試劑成分中含有某種被污染的項目;第二,試劑中含有下一個測試所要測定底物或含有的某種試劑成分,與下一反應所測定的底物有作用,因而直接影響下一反應測定的結果;第三,該試劑所引導的反應給下一個項目反應進程帶來了間接干擾[2]。從表3看出tc,hdl試劑2中對tba正干擾物質含量比較高,tg,ldl試劑2中對正干擾物質含量少一些,這與表1交叉污染結果是一致的。對于血脂試劑中對tba檢測產生正干擾的物質的分析,從試劑成分看,血脂試劑2中均含有過氧化物酶,但未標明其含量,它是否增強了tba循環酶反應,還是有其他物質增強了反應,有待于進一步探討。在檢測中為避免血脂試劑對tba檢測的影響,首先可以更改儀器參數,增加試劑針清洗次數;其次,可以調整試劑位,在血脂檢測與tba測試之間,加做幾個對tba無干擾的檢測項目;還可以運用儀器本身的預防交叉污染程度、tba反應程序控制項目的反應次序,先測試tba,再測試血脂。但因為在實際工作中,標本編排次序和項目組合的隨機性比較大,有時很難避開交叉污染,所以在編排標本檢測順序時,一定要考慮到血脂項目對tba的影響。

      由于試劑成分的復雜多樣性,實時儀器狀況的獨特性,可能發生的試劑間交叉污染的情況不盡相同,要想得到正確可靠的結果,不但要熟練掌握儀器操作,對儀器要精心維護和保養,也要了解各反應的原理,試劑組成,才能在實際工作中發現和避免試劑間的交叉污染。

      4  參考文獻
      [1]  顧寶國,陳潔,李燕,等.全自動生化儀使用中項目間交叉污染的探討[j].上海醫學檢驗雜志,2002,17(3):176
      [2]  于雷.生化自動分析儀項目間的交叉污染及其避免方法[j].臨床檢驗雜志,2003,21(3):168



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