| 實驗方法原理 |
帶有特異抗原的靶細胞（如正常細胞、腫瘤細胞、病毒感染細胞）與相應抗體結合后，在補體的參與下，引起靶細胞膜損傷，導致細胞膜的通透性增加、細胞死亡。染料（例如：伊紅-Y、臺盼藍）可通過細胞膜進入細胞內使細胞著色，故可用于指示死細胞或瀕死細胞，而活細胞不著色。此即補體依賴性細胞毒試驗，利用細胞毒試驗可以檢查細胞膜抗原，亦可鑒定抗體的特異性。 本實驗中，Thy-1抗原是小鼠胸腺T 細胞特異的表面抗原，在體外利用抗小鼠Thy-1 的單克隆抗體通過補體的協同作用，可殺傷95％以上的胸腺細胞。 |
|---|---|
| 實驗材料 | 小鼠 |
| 試劑、試劑盒 | Hank's液 抗小鼠Thy-1的單克隆抗體 補體 伊紅-Y染液 |
| 儀器、耗材 | 解剖器械 平皿 不銹鋼網 試管 吸量管 尖吸管 載玻片 蓋玻片 |
| 實驗步驟 |
1. 小鼠胸腺細胞懸液的制備 將 4～6 周齡小鼠采用頸椎脫臼法處死，取出胸腺放入已加入約4 ml冷Hank's液的平皿中，在100 目的不銹鋼網上研磨后，過篩，放入試管，離心1000 rpm，5 分鐘，用Hank’s液洗兩次。將沉淀的細胞重懸于Hank's液中，配成1×107 /ml細胞懸液。 2. 取試管3 支，標明順序，依據下表依次加入1×107 /ml胸腺細胞懸液、抗小鼠Thy-1 的單克隆抗體（最適稀釋度）及Hank's液，放入37 ℃水浴30 分鐘。 3. 取出后每管加入1 ％伊紅-Y 染液1 滴，混勻，室溫放置2 分鐘。
4. 重新混勻后分別在一張載玻片上滴片，加蓋玻片鏡檢。先在低倍鏡下觀察，再用高倍鏡觀察，比較3 管中細胞死活情況。
展開 |
| 注意事項 |
1. 胸腺細胞制備速度要快，且需在冰浴中進行操作，以保持細胞活力。 2. 抗Thy-1 的單克隆抗體和補體的效價要在預實驗中確定。 3. 細胞對照管死細胞數若超過5％，實驗需重新做。 4. 細胞滴加到載玻片上后長時間放置不檢測也可導致假陽性反應。
展開 |
| 其他 |
一、實驗結果 死細胞呈紅色，無光澤且腫脹變大；活細胞不著色、有光澤且形態正常。 高倍鏡下計數 200 個細胞并計算其中死細胞的百分數。
展開 |
近日，中國科學院武漢病毒研究所團隊，揭示了新型細菌抗病毒防御系統DRT4的工作機制。研究發現，在遭遇噬菌體入侵時，帶有DRT4防御系統的細菌通過“自殺式防御”策略，犧牲被感染個體以保全群體。這一防御系......
同學們都在知名期刊發表了論文，自己的研究卻毫無進展；無論實驗如何調整，都像在原地踏步；離提交博士論文進度報告只剩1個月，但連續開展了近1年的實驗卻宣告失敗……接連的失敗，讓ShreyaPramanik......
同學們都在知名期刊發表了論文，自己的研究卻毫無進展；無論實驗如何調整，都像在原地踏步；離提交博士論文進度報告只剩1個月，但連續開展了近1年的實驗卻宣告失敗……接連的失敗，讓ShreyaPramanik......
南京大學物理學院教授杜靈杰團隊利用極端條件下的偏振光散射技術，在砷化鎵量子阱中對分數量子霍爾效應的集體激發進行了測量，進而在全球首次觀察到引力子激發（引力子模）——引力子在凝聚態物質中的新奇準粒子。3......
分析儀器是一種用來測量、分析和監測物質性質和組成的工具。它們通常由硬件設備和軟件程序組成，可以用來檢測和分析各種物理、化學和生物學參數。常見的分析儀器包括光譜儀、質譜儀、色譜儀、電化學分析儀、生物分析......
近日鐘南山團隊發布的一項國際多中心研究表明，連花清瘟膠囊對輕至中度新冠肺炎（COVID-19）患者的癥狀恢復顯示出顯著效果。該研究在中國、泰國、菲律賓和越南的17個研究點進行，共納入410名接受連花清......
10月28日，石家莊以嶺健康城舉行了一場重要的啟動會——絡病理論創新轉化全國重點實驗室啟動會暨第一屆學術委員會第一次會議。此次會議標志著絡病理論創新轉化全國重點實驗室的正式啟動，并宣布中國工程院院士吳......
據中國載人航天工程辦公室消息，北京時間2023年10月26日11時14分，搭載神舟十七號載人飛船的長征二號F遙十七運載火箭在酒泉衛星發射中心點火發射，約10分鐘后，神舟十七號載人飛船與火箭成功分離，進......
暨南大學葉文才/張冬梅團隊研究揭示了代謝重編程介導腫瘤對血管靶向藥物耐藥的新穎機制，以及周細胞離子通道調控腫瘤血行轉移的分子機制。相關成果近日分別在線發表于《自然-代謝》《先進科學》。結直腸癌（CRC......
7月22日晚間，航天英雄、中國首飛航天員、中國載人航天工程副總設計師楊利偉，英雄航天員、神舟十三號航天員葉光富，400余名北京市中小學生代表和科技工作者代表齊聚中國科技館，共同參加由中國科技館聯合中國......
