在任何治療開發項目的第一階段，有必要使用一個完善的模型系統來審查比較新的治療藥物。用一個穩定的模型系統來比較新的治療方法。建立模型系統將為有效的篩選分析提供基礎，從而使研究者能夠有效地比較和對比他們感興趣的治療劑的各種生物學變化。重要的是，透明質酸介導的運動受體，也被稱為RHSMM，通常在乳腺癌，結腸直腸癌和前列腺癌中過表達。它已被證明可作為六種癌癥標志中的兩個即血管生成和侵襲/轉移的貢獻者。值得注意的是，RHAMM已被確定為一些高度侵襲性癌癥的生物標志物。在這方面，因此，開發靶向RHAMM的高特異性治療藥物可以抑制血管生成和侵襲/轉移，從而限制某些侵襲性腫瘤的擴散。不幸的是，重組蛋白質技術的使用對于足夠的生產和分離全長RHAMM蛋白質而言基本上是無效的，而這對于體外結合研究卻是至關重要的。
Leonard Luyt博士等人，使用OpenSPR局部表面等離子體共振技術獲得了他們最新發現的癌癥治療開發所需的關鍵性數據，并于2018年9月發表文章，標題為“A truncated RHAMM protein for discovering novel therapeutic peptides”，通過OpenSPR獲得的數據觀察其化學合成的7kDa RHAMM“mini-protein”的結合行為，其被工程化并用于篩選候選的治療性肽。
摘要
RHAMM是一種大的95kDa碳水化合物結合蛋白，負責許多細胞過程，包括細胞運動，組織修復和引發先天免疫反應。 然而，當過表達時，RHAMM已經在兩種主要的致癌過程中被發現，包括刺激血管生長（血管生成）和細胞侵襲和擴散（侵襲/轉移）。 從歷史上看，對于有意義的體外研究，全長RHAMM非常難以生產和分離。 由于它在腫瘤發生中起著重要作用，因此很明顯RHAMM對于研究至關重要。
此外，透明質酸（HA）是高分子量多糖，并且在細胞外基質中以高濃度存在。在片段化時，HA傾向于積累并且先前的研究已經證明這些片段化累積模式在血管生成過程中是同源的。
RHAMM傾向于結合HA并隨后與CD44（和一些生長因子受體）相互作用。反過來，激活了許多已知的癌癥途徑，包括RAS，ERK和MEK途徑。這些途徑主要負責不受控制的細胞生長，血管生成和細胞運輸等。值得注意的是，上述途徑依賴性事件是六個癌癥標志中的三個。值得注意的是，生產和分離全長RHAMM蛋白很難，加上HA-RHAMM在隨后的致癌途徑中的結合的影響，表明需要開發一種替代系統來篩選潛在的RHAMM治療干擾物。
在該文章中，研究人員通過Fmoc固相肽合成了7kDa RHAMM“mini-protein”，隨后使用圓二色譜分析了截短的RHAMM的結構。 應該注意的是，截短的RHAMM mini-protein被設計為僅包含HA結合位點，但也設計了沒有HA結合所需的關鍵殘基的陰性對照。 在合成和結構分析后，然后使用OpenSPR表面等離子體共振檢測了7kDa的 RHAMM mini-protein與其天然配體HA之間的結合動力學和親和力常數。 此外，許多已知結合重組RHAMM的微管蛋白衍生的HA肽類似物也用于驗證合成的RHAMM mini-protein的結合能力。
重要的是，Nicoya的SPR研究結果證明，7kDa RHAMM mini-protein是產生和分離全長重組RHAMM的極好替代品，因此未來對這一重要致癌因子的研究要求低得多。
OpenSPR對這項研究的幫助
表面等離子體共振（SPR）用于解析截短的RHAMM蛋白，HA和微管蛋白衍生的HA肽類似物之間的相互作用。 值得注意的是，在OpenSPR上進行了許多實驗，并使用了許多不同的表面化學傳感器芯片。 首先，將普通金芯片與胱胺功能化的HA一起孵育3天，并阻斷以防止非特異性結合。 功能性RHAMM mini-protein和相應的陰性對照（Ala-RHAMM）用作分析物。 隨后，將具有C末端His標簽的RHAMM mini-protein固定在NTA芯片上，并使用所有微管蛋白衍生的HA肽類似物作為分析物進行檢測。
重要的是，該結合數據清楚地表明化學合成的RHAMM mini-protein可以作為篩選用于破壞RHAMM-HA-CD44結合反應的抗癌肽候選物的有效替代品。 在這方面，OpenSPR結合數據提供了定量證據，表明可能不需要生產和分離重組全長RHAMM蛋白的繁瑣工作。 此外，通過使用OpenSPR，研究人員能夠從他們自己的實驗室平臺獲得SPR數據，以幫助他們加快研究并更快地公布他們的發現。
SPR是一項無標記的檢測技術，研究人員可以定量分析兩種生物分子之間的結合。
SPR技術使我們能夠確定相互作用的kon，koff和KD，與僅提供終點測量的其他技術如pull-down實驗相比，更能深入了解分子間的相互作用。
SPR不僅對于發表文章是必要的，而且對于許多醫學和醫學研究領域的發展也是必要的，如下圖所示，近幾年，依靠SPR數據發表的文章數量呈顯著增長。
Scientific publications involving SPR have increased drastically over the years. SPR has become fundamental for publications while traditional techniques like Western Blots are becoming less important.
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